测量比值荧光- PTI EasyRatioPro

这PTI EasyRatioPro从HORIBA Scientific是一种先进的基于单色-宽视场显微镜系统，设计成用于测量荧光染料强度或标记的蛋白质的比率在荧光纳摩尔浓度。

比率荧光显微镜是一种重要的仪器，用于分析动态发生在活细胞和细胞结构。与传统基于强度的荧光显微镜相比，比值荧光有助于消除细胞路径长度变化、载染不均匀、光漂白和视场不均匀的影响，使比值荧光成为建立细胞内离子浓度最精确的过程。

该PTI EasyRatioPro是提供关于离子浓度和相互作用与其他药物，分子，或加入的试剂重要动态数据快。它使用CCD，EMCCD或SCMOS摄像机从多达16个不同的激发波长，以及四个发射波长（可选地）荧光图像的灵敏和快速采集。它可以支持超过100个摄像头，更定期补充。

激发可以使用HORIBA的专利DeltaRam™X紧凑快速切换单色仪实现，集成了垂直或倒置荧光显微镜的液体导光器。

该PTI EasyRatioPro配备HORIBA公司的专利经驱动器，它是可以通过使用其独特的触觉控制表面提高生产率变换成像。

主要特点

PTI EasyRatioPro的主要特点是:

• Horiba的收购引擎（AE）可以实时将成像数据直接流到硬盘，以获取和播放
• 无损图像处理。处理插件可以在录制或回放过程中应用
• 内置实验会话文件用于跟踪对硬盘的RAID或服务器的所有成像数据
• 使用标准实验提供的会话模板可以轻松实现日常例程自动化，也可以进行定制
• DeltaRam™X几乎允许无限的激发波长从250到650 nm
• 曲驱动器提供实时控制约60个可编程功能键和触摸敏感滑块，以控制曝光时间，增益，分箱，和波长选择多达16个不同的通道。

软件功能

• 正方形，徒手，椭圆，线性轮廓绘制区域的感兴趣的光度测量在实时或在采集后
• 跟踪数学分析操作包括平均，反对数，微分，组合，XY组合，积分，线性拟合，寻峰
• 1-4的总指数衰减全球分析，指数分析方法拟合（ESM）
• 实时非破坏性插件，用于比率计算，阈值和基于ROI或基于图像的背景减法，平场校正，加，减，乘，除，三通道合成，调色板，校准，和ROI计算
• 实时生成一个用户定义的事件标记和事件日志
• 校准编辑器形成校准曲线使用点多项式拟合，Grynkiewics pH和Grynkiewics Ca⁺⁺公式
• 多达16个激发，发射，或衍生的信道的控制
• 图像数据的输出，以接受格式如AVI，TIF，JPG，BMP，PNG。
• Warp Drive人类用户界面控制，专门控制曝光，电子倍增，增益，静音，选择，solo，记录，窗口功能，慢跑/穿梭，播放，快进，倒带，停止，时间代码，循环等。

应用程序

EasyRatioPro已经用于离子成像使用专门设计和进一步精制用于动力学成像。

EasyRatioPro的主要应用包括：

• 线粒体、内质网和细胞内游离钙的测量²⁺
• 研究钙²⁺体内平衡,²⁺波的传播，钙²⁺动员，钙²⁺振荡，和Ca²⁺波定量
• 其他细胞内离子如Mg的测量²⁺，Mn.²⁺、锌²⁺，Sr.²⁺，na⁺和cl.^-
• 测定细胞内、溶酶体和液泡的pH水平和原位校准细胞内和细胞内的pH [Ca⁺⁺]和[Na⁺]
• 血浆膜电位，铁稳态膜电位，和线粒体膜电位的评价
• 检测通过在HEK293细胞株Pfcrt表达的免疫荧光
• 测量细胞体积和荧光Zn的检测²⁺在Min6细胞中
• 确定共表达GFP进行分析;mitoGFP和比例GFP（氧化还原GFP）研究
• 供体的激发光谱，供体发射强度，发射强度，供体/受体的发光强度，分子接近，受体发射强度，以及酶 - 底物结合的比率的FRET研究。
• 单HEK 293细胞的钙成像，凸轮的可用性研究的变化
• 在HEK293细胞中通过毛地黄皂苷选择性质膜透化的示范