静态光散射(SLS)采用光学装置,使检测到的信号是稳定的或“静态的”。“如果已知其他常数,那么就有可能通过测量样品散射光的强度来计算样品的分子量。”术语“静态光散射”被用来区分该方法与动态光散射,动态光散射是一种不同但并非无关的用于颗粒尺寸测量的技术。gydF4y2Ba
瑞利理论gydF4y2Ba
瑞利理论解释了样品散射光的强度与样品的大小和分子量之间的关系。被粒子和分子散射的光的性质根据散射光的对象而不同,如瑞利方程所定义的:yabo214gydF4y2Ba
在那里,gydF4y2Ba
- C =样品浓度,gydF4y2Ba
- θ是测量角,gydF4y2Ba
- RgydF4y2BaθgydF4y2Ba=测量角θ下的瑞利比(散射光强与入射光强之比)gydF4y2Ba
- 分子量=重量平均分子量,gydF4y2Ba
- 一个gydF4y2Ba2gydF4y2Ba=第二个维里系数。gydF4y2Ba
K, PgydF4y2BaθgydF4y2Ba是更为复杂的术语,其定义如下:gydF4y2Ba
在那里,gydF4y2Ba
- λgydF4y2Ba0gydF4y2Ba是真空中的激光波长,gydF4y2Ba
- NgydF4y2Ba一个gydF4y2Ba阿伏伽德罗常数,gydF4y2Ba
- ngydF4y2Ba0gydF4y2Ba为溶剂的折射率,gydF4y2Ba
- Dn /dc为样品的折射率增量。gydF4y2Ba
在那里,gydF4y2Ba
- RgydF4y2BaggydF4y2Ba分子的旋转半径是多少gydF4y2Ba
根据瑞利方程,在一定角度下的散射光强度取决于多个因素,其中包括样品的分子大小和分子量。正如瑞利方程所示,分子的大小和分子量越大,光被它们散射的越多。gydF4y2Ba
散射光强随分子量线性增加,但随分子大小呈非线性增加。因此,如果瑞利方程中的所有其他因素都已知,则散射光的强度对应于RgydF4y2BaθgydF4y2Ba可以通过测量来计算样品的分子量。gydF4y2Ba
静态光散射在GPC/SECgydF4y2Ba
SLS技术常用于分子量的测量。SLS测量可以在比皿或凝胶渗透色谱(GPC)/尺寸排除色谱系统(SEC)中进行。色谱系统的使用消除了与样品制备和纯化有关的许多问题。因此,它是用于实现SLS的最常用方法。gydF4y2Ba
此外,GPC/SEC可以很容易地将光散射数据与浓度检测器获得的数据集成在一起,从而同时确定样品的浓度。折射率检测器(RI)是最常用的浓度检测器,但紫外线(UV)吸收检测器也可以使用。gydF4y2Ba
图1所示。gydF4y2BaGPC/SEC系统的原理图。gydF4y2Ba
GPC/SEC系统的原理图如图1所示。脱气器,柱,注射回路和泵是标准的,可选的自动进样器。分子按给定的顺序由一个或多个探测器测量。在这里,RI探测器被放置在光散射探测器之后。gydF4y2Ba
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