使用LC-MS/MS分析饮用水中的微囊蛋白酶

为了在饮用水中分析米罗霉素（MCS），通过直接注射EVOQ Elite模型三倍四极杆质谱仪来设计LC-MS/MS技术。该技术非常敏感，可以在水中鉴定0.05 ppb的微囊藻蛋白具有提高的可重复性（RSD≤10％，n = 7），并且具有非凡的线性校准范围在0.05至50 ppb之间。

图1。EVOQ ELITE

图2。蓝细菌毒素微囊蛋白藻蛋白LR及其其他变体MC-RR和MC-yr的结构从R和L残基中替换为

MC是由蓝细菌产生的循环七体循环，发生在富含营养的湖泊和储层中。MC可以对人类和动物都有毒性。世界卫生组织（WHO）已经制定了1 µg/的指南，以调节饮用水中的MC-LR，这是蓝氧化物的标志。这项工作说明了一种用于检测和量化三种类型的蓝细菌毒素的LC-MS/MS技术，例如MC-LR，-YR和–RR通过直接注射在饮用水中。

实验

样品制备

Bruker从Sigma-Aldrich购买了微囊蛋白RR，LR和YR混合物（甲醇中的5 ug/mL），并使用超纯水稀释该混合物，以制备0.050至50 ppb的校准标准。

色谱法（Advance UHPLC）

• 列：Ace Excel 2 C18（100x2.1 mm I.D）
• 注射量：50 µL
• 柱温度：40°C
• 流速：0.4 mL/min
• 流动阶段B：乙腈
• 流动阶段A：具有0.1％甲酸的水

梯度条件：

• 0.00分钟30％b
• 1.00分钟30％b
• 7.00分钟95％b
• 7.10分钟30％b
• 10.00分钟30％b

质谱仪（EVOQ Elite）

• ESI：+4500 V
• 锥体气温：200°C
• 探针温度：350°C
• 雾化器气：50个单位
• 探针气：50单位
• 锥体气：15个单位
• 主动排气：开
• 碰撞气：1.5 mtorr的氩气

优化的MRM过渡：

• MC RR（MW：1038）：M/Z 520> 135（CE = 24V）
• MC LR（MW：995）：M/Z 498> 135（CE = 11V）
• MC YR（MW：1045）：M/Z 523> 135（CE = 9V）

图3。MCS的完整扫描光谱

结果与讨论

如上图所示，MCS的完整扫描光谱通过双电荷离子有所区别。由于它们的高灵敏度，这些离子被用作MRM技术开发的前体离子。由于ADDA残基的甲氧基裂解，MCS共享m/z 135的公共产物离子。[PHCH₂CH（OCH₃）]⁺

下面给出的表概述了七个重复注射0.05 ppb标准解决方案，该图证明了MC校准曲线在0.05 ppb和50 ppb之间，并与R一起显示出显着的线性性²> 0.997。

表格1。重复性为0.05 ppb mcs

	MC-RR	mc-yr	MC-LR
ind。＃1	1246	300	478
ind。＃2	1239	364	584
ind。＃3	1396年	340	620
ind。＃4	1157	345	585
ind。＃5	1166	339	527
ind。＃6	1189	318	585
ind。＃7	1147	384	487
平均的	1220	341	552
标准开发	87	28	55
％RSD	7.1	8.1	10

图4。0.5 ppb混合标准MC的色谱图

图5。MC的校准

结论

使用三个阶在EVOQ Elite三倍四极杆LC-MS/MS系统上的动态范围（0.05 ppb -50 ppb），Microcystin-LR，RR和YR可以轻松评估。LC-MS/MS技术能够满足检查饮用水中的微囊蛋白酶的必要性。

该信息已从布鲁克化学和应用市场提供的材料中采购，审查和调整。亚博网站下载

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