稳健的性能和持续的高灵敏度对于成功执行定量分析的实验室操作至关重要。本文展示了EVOQ LC-TQ在马等离子体的分析中持续的高敏性性能。
评估EVOQ LC-TQ离子源设计，以稀释和射击方式利用马等离子体，从而消除了在线转移阀的使用。在注入每个样品期间，将离子源的暴露量用于所有矩阵。
电喷雾过程中加热探针气体在加热探针气体下的液体洗脱液的去溶解导致污染物的可能聚集，例如蛋白质，糖，脂质和盐与离子源。这会导致灵敏度随着时间的流逝而降解。EVOQ的新离子源是通过仔细检查离子源室内的气流动力学来设计的，从而消除了再循环并避免了冷点和合并的区域。
主动排气系统
气体夹带排气（主动排气）系统用于增强离子源的鲁棒性，而不会损害灵敏度。通过轻微的压力差，主动排气系统清空了离子源外壳，从而避免了雾化气体和污染物的再循环。由于较大的排气开口，可以快速去除雾化的组件，从而确保面向离子采样孔的区域的清洁度。雾化气体被夹在活跃的排气系统的气流中，使其从LC-MS系统中移除。
.jpg)
实验
样品制备
选择用于评估源鲁棒性的矩阵被用clenbuterol尖刺的马等离子体崩溃。冷酸化的乙腈（3：1 v/v）用于崩溃的马血浆。将样品离心10分钟，然后在1：1 v/v中分散所得上清液中的流动相位。
色谱法（Advance HPLC）
- 列：C18、3µ，100x2.1mm（ACE，零件号：111-1002）
- 流速：0.45ml/min
- 注射量：30µL
- 流动阶段A：具有0.2％甲酸的水
- 流动期B：乙腈，甲酸0.2％
- 梯度条件：
- 0.0min 10％b
- 0.3分钟10％b
- 2.5分钟95％b
- 2.8分钟10％b
- 4.5min 10％b
质谱法（EVOQ Elite）
- VIP加热-ESI温度：300°C
- 雾化器气：90个单位
- 加热探针气：68个单位
- 锥体气：10个单位
- 锥体气温：300°C
- 喷射电压：+3500 V
- clenbuterol＆d9-clenbuterol MRM过渡：
- clenbuterol：m/z 277.1> 168（CE：25 V）
- D9-Clenbuterol：M/Z 286.1> 204（CE：12 V）
.jpg)
结果与讨论
创建了四个校准曲线，并在两个相邻校准之间注入100个矩阵样品。每个校准曲线保持恒定响应因子（<10％RSD）是目标。结果由EVOQ系统相对于两天的响应因子RSD <5％和400多个总注射矩阵样品，响应因子RSD <5％都超过了目标。
响应因子是面积比（校准/IS）与整个校准范围内的浓度之间的比率。响应因子的RSD％是对敏感性的严格度量，因为它说明了曲线上校准点的每个变化。敏感性的任何降低都将通过较高％的RSD响应因子显示。必须同时证明离子源的鲁棒性并持续持续高灵敏度。与描绘高水平重复注射的情节相比，该演示具有更高的价值，通常在供应商的营销文献中发现。
响应因子的四个校准曲线'％RSD低于5％，这一值符合经过验证的生物分析技术的接受规范。图3描述了覆盖的第一和第四校准曲线，反映了整个校准范围内的高灵敏度，而差异无关。
.jpg)
图3。曲线1和曲线4的覆盖层，表明在400个血浆注射过程中持续持续的高灵敏度性能。
表1和表2证明了离子源反复暴露于血浆样品后持续的高灵敏度性能，这是典型的生物分析实验室中不良环境的重要先决条件。
表格1。。校准曲线1
| 样本ID |
浓度（pg/ml） |
面积比 |
响应因素 |
| 等离子体C1 |
5 |
0.0229 |
0.00459 |
| 等离子体C2 |
10 |
0.0468 |
0.00468 |
| 等离子体C3 |
25 |
0.1130 |
0.00452 |
| 血浆C4 |
50 |
0.2162 |
0.00432 |
| 血浆C5 |
100 |
0.4556 |
0.00456 |
| 血浆C6 |
200 |
0.8706 |
0.00435 |
| 血浆C7 |
400 |
1.7639 |
0.00441 |
| 等离子体C8 |
500 |
2.2001 |
0.00440 |
| 等离子体C9 |
750 |
3.5731 |
0.00476 |
| 等离子体C10 |
1000 |
5.0905 |
0.00509 |
| 等离子体C11 |
1500 |
6.9408 |
0.00463 |
| 等离子体C12 |
2000 |
9.5574 |
0.00478 |
| 血浆C13 |
2500 |
11.6480 |
0.00466 |
| 平均值：0.004596 |
| 标准开发人员：0.0002104 |
| 响应因子的RSD％4.58％ |
表2。校准曲线4
| 样本ID |
浓度（pg/ml） |
面积比 |
响应因素 |
| 等离子体C1 |
5 |
0.0227 |
0.0045 |
| 等离子体C2 |
10 |
0.0477 |
0.0048 |
| 等离子体C3 |
25 |
0.1117 |
0.0045 |
| 血浆C4 |
50 |
0.2144 |
0.0043 |
| 血浆C5 |
100 |
0.4462 |
0.0045 |
| 血浆C6 |
200 |
0.8549 |
0.0043 |
| 血浆C7 |
400 |
1.7819 |
0.0045 |
| 等离子体C8 |
500 |
2.1869 |
0.0044 |
| 等离子体C9 |
750 |
3.5756 |
0.0048 |
| 等离子体C10 |
1000 |
4.9443 |
0.0049 |
| 等离子体C11 |
1500 |
6.7704 |
0.0045 |
| 等离子体C12 |
2000 |
9.5426 |
0.0048 |
| 血浆C13 |
2500 |
11.8610 |
0.0047 |
| 平均值：0.004568 |
| 标准开发人员：0.0002111 |
| 响应因子的RSD％：4.62％ |
每个校准曲线的第一个校准水平的色谱图如图4所示。
.jpg)
图4。从第一到第四校准中，在马等离子体（150 FG柱上）中5个PPT clenbuterol的代表性MRM色谱图，说明了一致的峰面积，从而说明了响应因子。
结论
在这个实验中，EVOQ LC-TQ成功分析了400个矩阵样品，在48小时内具有微不足道的灵敏度丧失。主动排气设计使EVOQ LC-TQ上的离子源尽管反复暴露于基质，以最高灵敏度水平运行，从而促进了定量分析实验室的成功运行。
该信息已从布鲁克化学和应用市场提供的材料中采购，审查和调整。亚博网站下载
有关此消息来源的更多信息，请访问布鲁克·道尔顿学。