紫外可见范围的微光谱是单个蛋白质晶体分析的关键技术。目前,蛋白质晶体用于受控药物输送,结构生物学和药物设计以及生物序列。UV微光谱镜用于单个晶体的光学特性以及生长晶体的质量控制。
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Craic Technologies提供20/20 PV微光光学计,这有助于以快速,简单和无损的方式定位,合格和分析生物晶材料。亚博网站下载
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对于这一范围的实验,配置了20/20 PV微光谱仪以进行透射和荧光。所使用的目标是15倍的schwarzild类型,因为它在整个紫外线,可见和NIR区域具有很长的工作距离和光谱一致性。在这个实验系列中,使用吸光度微光谱学研究了四个不同的样品。样品1、2、3和4分别包含DNA晶体,黄素蛋白晶体,溶液中的CO盐晶体和DNA-蛋白质晶体。
从每个样品中,将200 µL的溶液摄入并放置在肋骨96井中,该井板具有良好的紫外线传输特性。确定了晶体的位置,并使用Kohler照明优化了系统。在获得晶体光谱之前,参考引用到每个晶体的侧面。因此,消除了井板,溶液和仪器的光谱特性。最终光谱仅为晶体。
结果
获得了四个样品的吸光度光谱(见图1)。样品1、2、3和4分别标记为DNA晶体,黄素蛋白,溶液中的盐晶体和DNA/蛋白质晶体。除盐外,所有光谱均在286 nm处呈现吸光度峰。DNA晶体表现出非常强烈的峰,表明光密度高。同样,这是DNA晶体的唯一峰。
图1。样品的吸光度光谱覆盖1 - 4。
初次检查期间,黄素蛋白在354、414、442和446 nm的波长下表现出肩膀。但是,在重复检查过程中,黄素蛋白光谱显示出一些变化(见图2)。DNA/蛋白质晶体的光谱显示在352 nm处的峰。
图2。短期和长期暴露于氧气时,黄素蛋白晶体吸收光谱的叠加。
还获得了每个晶体的图像(见图3)。黑色正方形指示微光照射仪的入口孔径为15x15 µm。
图3。水晶图像。顺时针从左上方:DNA晶体,开始溶解后的黄蛋白晶体,溶液中的盐晶体和DNA/蛋白质晶体。
结论
DNA晶体的UV可见吸收光谱,黄素蛋白晶体,盐晶体和DNA/蛋白质晶体使用使用该光谱20/20 PV微光光学计。所有光谱都可以易于区分,并且光密度也可以比较。此外,还监测黄素蛋白光谱的变化。
关于CRAIC技术
CRAIC Technologies™是紫外可见的NIR微分析的优质仪器的主要开发商。可以分析从亚微米到数百微米的样品特征的光谱和图像。CRAIC技术产品包括紫外线和NIR显微镜,紫外可见的NIR微光谱测量器,在微观尺度上测量薄膜厚度和比色法的仪器,拉曼微光谱仪,自动化解决方案,自动化溶液,可停止标准等。已经开发了用于许多领域的专业系统,包括玻璃煤分析,蛋白质晶体,法医和半导体计量学。
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