显微检查用血管内支架薄片的制备

冠状动脉支架是一种金属支架,在已经闭合或似乎要闭合的动脉内用球囊导管扩张。冠状动脉支架通过撑开动脉来恢复足够的血流到心肌。

冠状动脉支架的发明者是查尔斯·多特,他在1969年发明了他的第一个支架。查尔斯·多特继续改进和发展他的设计,并在1983年与安德鲁·克雷格一起发明了一种由镍钛诺制成的可扩展支架,这种材料现在经常用于支架。

支架的组织学检查

虽然支架的使用已经变得越来越普遍,但更好地理解人体与支架之间的相互作用仍然是一个重要的临床课题。不同支架设计、材料、表面涂层和辅助药物治疗的研究需要对支架血管进行详细的组织学和免疫组织化学分析,尤其是在原位支架的组织-金属界面处。亚博网站下载

适当的制备技术将增强对临床支架植入的细胞反应的理解,尤其是在组织支架界面。此外,它将允许对膨胀特性进行密切评估。这些观察结果甚至可能导致改进支架设计的发展。

组织学检查用支架的制备

  1. 取出支架动脉,用生理盐水冲洗,并在正式生理盐水中浸泡固定两小时。
  2. 在切片前植入支架动脉。选择一个安装化合物,将减少收缩和不会软化在切片过程中。低粘度环氧树脂,如EpoThin®,是一个很好的选择。根据产品标签上的说明测量树脂和硬化剂。彻底混合成分,但要轻柔,以避免过度形成气泡。在使用之前,让混合物静置几分钟,让任何剩余的滞留空气上升到顶部。将试样置于模具中,用环氧树脂真空浸渍试样。倒入足够的环氧树脂,使其完全覆盖试件。
  3. 在使用精密锯切割之前,使用MetaServ®250研磨抛光机或类似抛光机,使用600(P1200)粒度和1200(P2500)粒度的CarbiMet®SiC砂纸研磨底座的端面。
  4. 用接触胶将地面粘在幻灯片上。有机玻璃载玻片比玻片提供更大的附着力嵌入部分。然而,用600 (P1200) CarbiMet®SiC砂纸对载玻片进行预磨可以改善其附着力。
  5. 选择一个刀片来切割将使切口损失最小化的材料(由于刀片穿过试样的厚度而从试样中损失或移除的材料量)。
    注意:当使用薄刀片时,应选择法兰(刀片支架)来提供最大的支撑,以防止在分段时发生弯曲或扭矩。
    带有粘结立方氮化硼的IsoCut®晶圆刀片可重复获得每15mm支架28至30个截面。
  6. 将封装好的试样安装到机器的卡盘上IsoMet®精度。对准千分尺,从标本的滑动端移去50 - 100µm的切片。
  7. 重复步骤3和4,为下一段准备块表面。重复这个过程,将连续的切片贴在幻灯片上。
  8. 使用一系列CarbiMet®碳化硅砂纸将每个部分打磨至所需厚度10–20µm。SiC固定磨料用于防止将磨料嵌入试样的组织部分。
    从320 (P400)砂砾开始,然后进行360 (P500), 400 (P800), 600 (P1200)和1200 (P2500)砂砾。小心地工作,避免太快或不均匀地清除材料。在每一步之间,都要确认在进入下一个砂纸之前,已经有了统一的划痕。
  9. 在进行最后的观察之前,使用3µm UltraPrep™A型金刚石研磨膜进行抛光。

支架动脉的薄切片,显示组织支架界面。

支架动脉的薄切片,显示组织支架界面。

用于组织学检查的薄切片的自动制备

手工打磨和抛光薄片需要大量的专业知识和时间。手工研磨也往往有利于薄断面的一边或另一边,最终使一边比另一边更薄。

不均匀的表面和厚度将提供不理想的组织化学分析。为了准备用于组织学和免疫组织化学染色的标本,必须将标本研磨至5µm的均匀厚度。

为了尽量减少上述问题,当用手准备样品时,应使用具有固定止点的夹具。例如,Histolic精密研磨夹具(60-8087)有硬质合金停止,防止试样被地面和帮助获得均匀和所需厚度的试样。夹具是为27 x 46mm大小的幻灯片设计的。

便携式生物素™ 薄切片设备(38-2100)已成功用于获得5µm的切片。全封闭系统使用滚珠轴承来控制施加的力的大小和滑块的位置。对于最终稀释,在染色之前,建议使用3µmUltraPrep™ A型金刚石研磨膜使用。

在大多数半自动抛光机上,通过使用岩相/组织薄片滑座(69-1584)和单次施加力,可以实现自动磨削过程。包含切片标本的载玻片用双面胶带粘在载玻片支架上。然后将单个载玻片支架放入单力载玻片支架中。根据所需的清除速率,施加3至5 psi的压力。至少每2分钟评估一次标本,直到建立了最佳程序。

app亚博体育用于显微检查的支架薄片制备设备

app亚博体育设备*
铸造N'Vac浇注料真空系统
IsoMet®系列线性精密锯
MetaServ®250研磨抛光机或其他研磨抛光机
耗材*
isocout®CBN晶圆片
EpoThin®低粘度环氧树脂
CarbiMet®研磨盘
UltraPrep™ 金刚石研磨膜

该信息来源于Buehler提供的材料,经过审查和改编。亚博网站下载

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引用

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  • 美国心理学协会

    布勒。(2021年2月1日)。为显微镜检查准备血管内支架薄片。亚速姆。于2021年8月16日从//www.washintong.com/article.aspx?ArticleID=5216.

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    比勒。“显微检查用血管内支架薄片的制备”。AZoM. 2021年8月16日.

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    比勒。“显微检查用血管内支架薄片的制备”。AZoM。//www.washintong.com/article.aspx?ArticleID=5216。(2021年8月16日生效)。

  • 哈佛大学

    比勒》2021。显微检查用血管内支架薄片的制备.viewed september 16, //www.washintong.com/article.aspx?ArticleID=5216。

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