CRAIC Technologies是世界领先的紫外-可见-近红外显微分析科学仪器的开发公司。这些包括QDI系列紫外-可见-近红外显微分光光度计仪器,旨在帮助您无损地测量微观样品的光学特性。CRAIC的UVM系列显微镜覆盖UV,可见和近红外范围,帮助您分析亚微米分辨率远远超出可见范围。CRAIC公司还拥有CTR系列拉曼微光谱仪,用于微观样品的无损分析。不要忘记,CRAIC自豪地支持我们的显微光谱仪和显微镜产品,提供无与伦比的服务和支持。
什么是显微分光光度计
的UV-visible-NIR显微分光光度计用于测量微观区域或微观样品的光谱。它可以配置为测量小于一微米的样品区域的透射率、吸光度、反射率、偏振和荧光。
显微分光光度计的设计与组成
显微分光光度计有时被称为显微镜分光光度计,因为它结合了光学显微镜和高灵敏度的分光光度计。实际上,显微分光光度计是一个完全集成的,专用的仪器,而显微镜分光光度计是标准显微镜的附加组件。因此,由于显微镜本身的原因,附加组件具有一定的性能限制。集成仪器避免了这些限制,因为它是专门为微光谱设计的。
在显微分光光度计中,如CRAIC技术公司制造的,分光光度计与专门设计的显微镜集成在一起。显微镜光学和光源的质量是最高的,能够在紫外、可见和近红外区域操作(普通显微镜只能在可见范围内操作)。分光光度计与数字成像系统一起安装在显微镜中,这样就可以从最小的样品中收集到最大的光量。因此,显微分光光度计是一种非常灵活的仪器,可以测量亚微米大小的样品的吸收光谱、透射光谱、反射率和发射光谱(如荧光光谱)。
显微分光光度计的工作原理
显微镜分光仪和显微分光仪的工作原理是这样的:显微镜上的一盏灯发出白光,聚焦在样品上。样品对某些波长的光的吸收能力强于其他波长。这完全取决于样品的发色团的化学结构和环境。未被吸收的光被显微分光光度计物镜收集并聚焦到分光光度计的入口孔径上。当光圈被反射时,大部分光线被反射到数字成像系统中。这可以让你看到分光光度计光圈覆盖在样品上,使它非常容易校准系统和采取光谱。图1显示了入口孔为黑色正方形。只需移动舞台,使正方形在样品上进行测量。
图1.样品的微分光孔径同时成像
没有反射到数字成像系统的光将通过光圈进入分光光度计。光通过光栅分解成不同波长的组件,每个组件的强度由电荷耦合器件或CCD探测器上的一个像素测量。计算机存储这些信息,得到的结果就是光谱。这个光谱被绘制成XY图表,显示了每个波长的光能(图2)。
图2.吸光度微光谱测试单个像素的LCD显示
不同类型的显微光谱学是由不同的照明技术完成的。这些技术由样品本身决定。例如,入射或反射照明用于不透明样品,而透射光用于透明样品。一个显微分光光度计可以配置来测量透射光谱,吸收光谱,反射光谱和发射光谱。
图3.透射显微分光光度计的总图
图4.反射率显微谱仪的总图
图5.显微荧光计的总图
在操作中,测量是直接的。首先进行暗扫描,测量系统的暗计数,然后收集参考物质的光谱。参考光谱包含了参考物质本身、光源、光学和CCD的光谱特性。然后从样品中获得光谱,并使用算法来计算适合该照明条件的光谱,即测量入射照明时的反射光谱。该算法由计算机自动应用,结果以频谱形式显示。
这些信息已从CRAIC技术公司提供的材料中获取、审查和改编。亚博网站下载
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