M3是一种新的zeta电位测量方法,它利用了毛细管细胞中固定层和快速场反转(FFR)技术的最佳特性。M3包括慢场反转和快场反转测量,因此被称为“混合模式测量”。在FFR中,应用领域的反向足够快,以致电渗透变得不显著。这给出了准确的平均值,但分辨率低于标准的固定层技术。
除了可以更好地测量实际分布宽度的零场测量外,还对每一个ζ电位的测定进行了两次测量。
- 快速场反转测量,提供了结果的准确性和稳定性
- 慢场反转测量,以提高分辨率。
使用混合模式的好处Zeta电位的测定
该方法的优点是提高了分辨率,对细胞排列不敏感,降低了对细胞壁污染的敏感性。此外,还可以计算出细胞壁的ζ电位。
细胞壁的ζ电位对溶质从溶液中吸附很敏感,可以用来跟踪吸附动力学和建立吸附等温线。本文综述了磷脂脂质体的阳离子和阴离子吸附的研究进展。壁电位反映了吸附过程,阳离子脂质体使壁电位在1 ~ 3小时后由净玻璃表面的负值逆转为正值。在平衡状态下,极限壁zeta电位符合Langmuir吸附等温线。在本应用笔记中提出的工作的更详细的说明发表在Langmuir上。
实验
利用各种脂类成分,如DPPC:胆固醇:DDAB (80:11:9 mol %),在1/10稀释磷酸盐缓冲盐水(PBS)中挤压制备脂质体。用a莫尔文Panalytical Zetasizer直径为3000HS, z平均直径为124±5μm。
采用M3技术进行壁电位测量。在测定每个脂质体样品前,先清洗毛细管细胞,用Malvern Panalytical zeta电位转移标准DTS0050测定壁zeta电位。
结果与讨论
测量了脂质体脂质浓度的范围。图1显示了阳离子脂质体DPPC:胆固醇:DDAB (80:11:9 mol %)的壁电位随时间的变化。壁电位从极低脂质体脂质浓度时的负值转变为正值。在较高的浓度下,稳定壁电位(以下称为平衡壁电位)的发展是缓慢的,需要1到3个小时。
图1所示。25°C条件下,1/10稀释PBS溶液从DPPC:胆固醇:DDAB (80:11:9 mol %)脂质体吸附时间的函数。脂质体脂质浓度分别为0.01、0.03、0.06和0.34mM。
壁电位符号的变化表明,阳离子脂质体和/或阳离子脂质吸附在电泳池的硅玻璃表面。
图2显示了平衡壁ζ电位作为脂质体脂质浓度的函数。
图2。在25°ACC的1/10稀释PBS中,平衡壁zeta电位作为浓度对DPPC:胆固醇:DDAB脂质体(80:11:9 mol %)吸附的函数。
曲线显示,当表面被阳离子脂质体饱和时,净硅玻璃表面的负壁zeta电位急剧上升到正极限值。
结论
应用M3技术研究了脂质体在毛细管电泳池平面硅胶玻璃表面的吸附。
结果表明,壁电位的测量是跟踪脂质体在平面硅玻璃上吸附动力学和平衡吸附的一种新方法。
最后,人们可能会问,这堵墙到底有多大电动电势测量方法可以广泛应用于玻璃以外的表面。在这种新技术中,任何可以在玻璃表面涂上足够透明表面的材料都可以作为吸附表面。
由于只需要在玻璃表面薄薄地涂一层,这项技术可以很好地应用于由聚合物和其他表面涂层制备的广泛的表面层。
这些信息已经从Malvern Panalytical提供的材料中获得,审查和改编。亚博网站下载
有关此来源的更多信息,请访问莫尔文Panalytical.