衰减全反射傅里叶变换红外(ATR-FTIR)分析biofluids光谱是一个很好的工具。可以从样本中提取生物指纹作为红外光谱通过监测分子键振动红外光线刺激的示例。
医疗研究人员和医生“biofluid活检”感兴趣,因为它们构成的采样误差最小程度的技术。ATR-FTIR可以用来检验各种biofluids,包括血液、唾液、尿液。可以区分健康和病人通过比较之间的光谱差异biofluid样本。
最经常利用biofluid诊断医学是血液,包括血小板、血浆,红细胞和白细胞。血浆或血清经常用于光谱分析从两种解决方案都可以冷冻保存。
全血的冻结过程会导致细胞解体,血红蛋白有显著的光谱的影响。
如图1所示,血清分离血细胞和血小板通过允许血液凝块,而等离子体是由离心法分离水溶液中抗凝血剂管。血清是更频繁地使用,因为它比其他制备方法更有效地去除红细胞。
图1:血浆与血清。图片来源:爱丁堡仪器
的基本振动生物样品的官能团,如蛋白质、脂类、氨基酸,不仅可以检测到使用ATR-FTIR中(4000厘米不等1-400厘米1)。除了产生快速的结果和一个简单的、低成本的方法来诊断,手术只需要适度样本体积每毫升的顺序。
ATR-FTIR光谱学已经证明有效的血清分析各种疾病调查,包括癌症、子宫内膜异位症、脑部疾病、病毒感染。1 - 6
水对Biofluid测量的影响
水的影响,红外光谱是一种缺点的ATR-FTIR biofluid分析,如图2所示。
图2:ATR-FTIR频谱。图片来源:爱丁堡仪器
由于其极性,水具有很高的红外响应,掩盖了生物信息在样本biofluids分析了利用ATR-FTIR液相。通常情况下,在研究biofluids,用户必须等待样品干燥前生物频谱是可见的。然而,这整个收购过程减慢。
使用加热ATR附件是更快和更方便的方式。样品可以加热更快地使水蒸发,减少所需的时间收集。本文将水从血清样本同时快速测量的频谱使用IR5与激烈的ATR FTIR光谱仪配件。
亚博网站下载材料和方法
爱丁堡仪器IR5与激烈的ATR FTIR光谱仪配件是用来测量人类血清白蛋白的一个示例。钻石作为ATR的内部反射元素(愤怒),一个共同的愤怒由于其高折射率和耐久性。钻石架ATRs适合加热实验由于其优良的导热系数。
图3:爱丁堡IR5 FTIR光谱仪的仪器。图片来源:爱丁堡仪器
显示加热ATR如何影响干燥时间、样本用移液器吸取到的3μL ATR未经加热,和光谱。ATR是预先加热,保持在50°C程序。
一项决议的红外光谱聚集4厘米1,平均10光谱,收购时间为每个光谱35秒。
结果与讨论
图4显示了人类血清白蛋白红外光谱两分钟后在室温下干燥(蓝色)和加热ATR(红色)。强大的吸水乐队在室温ATR光谱测量,模糊的生物频谱。
图4:ATR-FTIR光谱2分钟后在室温下干燥时间的人类血清白蛋白(蓝色)和加热到50°C(红色)。图片来源:爱丁堡仪器
整个生物频谱自由水的干扰是实现加热ATR。生物频谱的时间是充分披露进行分析在室温下蓝色光谱干后再将超过15分钟,明显降低测量吞吐量。
图5列出了带作业血清光谱和细节的关键信息ATR-FTIR biofluid中组件提供了关于生物样本。红外的high-wavenumber地区bio-spectra跨越2600厘米之间1和3800厘米1双键,而low-wavenumber地区,包括拉伸和指纹区,跨越2000厘米之间1和500厘米1。
最歧视的数据生成在low-wavenumber范围,大多数诊断。7
图5:人类血清ATR-FTIR谱带作业。图片来源:爱丁堡仪器
结论
血清样本的生物指纹突显出异常的敏感性IR5 biofluids的分析。IR5被加热ATR附件解决寄生吸水。光谱采集前的干燥时间明显缩短,利用加热ATR在不牺牲光谱质量。
引用和进一步阅读
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这些信息已经采购,审核并改编自爱丁堡仪器提供的材料。亚博网站下载
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