之前的样品制备进行红外光谱(IR)研究与研究本身一样重要,和样品很难溶于任何与溴化钾IR-transparent溶剂混合(KBr)。本文讨论在红外光谱学溴化钾的角色。
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电磁(EM)图谱由七种不同的电磁辐射波长从10-12年到103m。每个辐射类型属于一个波长支架,在科学研究作为能量的一种形式。设计一个光谱仪包括源为特定电磁辐射吸收的样品,表示为图绘制对波长吸收。
红外光谱测量红外辐射吸收的化学分子的兴趣。每个化学分子都有一组的官能团吸收红外辐射。无论化合物的结构、官能团倾向于吸收红外辐射相同的频率。分子结构之间的关系,它可以吸收红外辐射的频率允许的结构预测未知的分子。
实际上,不仅低能量中在高能近红外线光谱比(NIR)光谱,不仅由于光谱中光谱源于简单的分子振动模式导致更清洁的光谱。
溴化钾的角色(KBr)的红外光谱
在进行样品制备红外研究为研究本身一样重要。此外,准备样例中使用的载体应该光学透明红外地区(4000 - 400厘米1)。在这种背景下,碱金属卤化物和溴化钾(KBr)作为载体透光率为100%。不仅在中光谱的主要问题是高辐射的吸光度样品,这可以通过稀释样品光谱级KBr解决。
样品很难溶于任何IR-transparent溶剂在红外光谱与溴化钾混合。目标样本分析是地面和溴化钾粉末压制成盘,也被称为一个小球。KBr的粒子大小起着至关重要的作用在颗粒制备。
样品制备和KBr在红外光谱
如果测试样本在本质上是无定形的,它溶解在无水的挥发性溶剂,然后沉积一层薄的样品在KBr细胞通过蒸发溶剂。
KBr颗粒的方法,有必要溴化钾粉末粉碎成200 -网格大小之后,在摄氏110°干燥删除任何束缚水分子。样品颗粒的13毫米直径,0.1到1%的样品与200 - 250毫克的KBr粉混合。接下来,样品颗粒粉,放入pellet-forming死去。此外,8吨的力是应用在真空下几分钟形成一个透明的样品颗粒,和脱气消除了空气和水分子。
在漫反射方法中,KBr是漫反射附件包装样板测量为背景,其次是稀释样品粉末在溴化钾粉末的合成混合物倒入样板和包装红外光谱测量。
在所有上述方法,至关重要的是保持样本和KBr颗粒干燥的水分子的存在给广泛的水达到3200厘米1,这与官能团峰(胺类、羧酸、酒精)在3500 - 3000厘米1。
红外光谱揭示蛋白质结构在KBr丸——的研究
傅里叶变换红外(FTIR)光谱被用来确定蛋白质二级结构在不同的物理状态,包括解决方案,停赛,凝胶,固体。蛋白质结构测定中使用最频繁的方法是准备一个KBr小球的冻干的蛋白质。
在发表的一项研究制药科学杂志》亚博老虎机网登录作者决定两种蛋白质的结构,溶菌酶,和α-chymotrypsinogen特点酰胺键使用红外光谱测定。结果显示,KBr加工是一种方便可行的选择确定干蛋白的结构和配方。
在另一项研究发表在杂志上分析生物化学,作者分析了13个球状蛋白质的二级结构在KBr颗粒通过红外光谱。结果显示一个更好的相关性α-helix和β-helix酰胺我的乐队,在蛋白质二级结构保存在固态,挤进KBr颗粒。奇异值分解)分析表明,蛋白质的吸光度相比,KBr颗粒是准确的在溶液中吸光度。进一步,作者发现,固态的蛋白质二级结构是一个更好的方法来研究水不溶性蛋白质、纤维、蛋白质和谷物储备比溶解在有机溶剂。
在另一项研究发表在Talanta,作者设计了一种最优化方法正确材料的光谱KBr磁盘通过消除干扰。亚博网站下载这是一个常见的问题在红外分析蛋白质和多糖使用KBr磁盘技术。由此产生的蛋白质谱更准确比衰减全反射(ATR)光谱。
结论
总而言之,KBr是光学透明的红外光谱的指纹区,因此作为载体的形式磁盘或颗粒。结构确定的敏感生物分子如蛋白质有可能采用红外光谱和KBr磁盘技术,特别是在确定他们的初级和二级结构。
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引用和进一步阅读
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