QSight™质牛奶中抗生素/ MS方法分析

磺酰胺类通常被称为“磺胺类药”——衍生品的磺胺(p-amino苯磺酰胺)。他们经常使用抗菌药物常见的细菌性疾病的兽医治疗因其抗菌性能、低成本和低毒性。²

自由的使用兽药和未能遵守戒断期会导致药物残留在动物组织后治疗。这些残留物可以传递给人类通过动物的奶。^3、4

这是常见的做法在奶牛使用各种抗生素不同的治疗方法,但这最终导致牛奶中抗生素残留的积累,可能引起过敏反应,当被人类的毒性。

这些疗法也可以促进发展具有抗药性的细菌。^5、6

欧盟监管机构发表了一系列的官方文件,更好的调节控制兽药为了保护消费者。理事会指令96/23 / EC7轮廓控制的兽医残留在食品生产的动物。

在印度,FSSAI(公报通知日期为2018年7月20日)和启德集团(RMP养殖、鸡蛋、蜂蜜、牛奶家禽等)授权抗生素的早期和频繁的分析。启德集团和FSSAI建立最大残留限量(MRLs)的一系列具体从动物食品中抗生素残留经常发现矩阵。

至关重要的是,牛奶是检测磺胺类药残留为了维护消费者的安全,防止对兽药的敞口。本文概述了一种快速、敏感质/ MS方法牛奶中磺胺类抗生素的定量分析。

实验

硬件和软件

一个PerkinElmerLX-50 UHPLC系统用于色谱分离同时进行检测通过PerkinElmer QSight™220三重四极质谱仪,配备应急服务国际公司和APCI电离源。

仪器控制、数据采集和数据处理都是使用简单执行3 q™软件在一个窗口。表1提供了LC参数,包括列和流动相梯度程序。

表1。UHPLC参数。来源:PerkinElmer食品安全和质量

LC列	大学C18AQ 100 mm X 3毫米X 2.1μm (P / N N9304784)
流动相一	0.1%的甲酸水
流动相乙	在乙腈0.1%甲酸
流动相梯度	老不。 时间 %的 % B 1 0.00 98年 2 2 1.50 98年 2 3 6.00 4 96年 4 6.50 4 96年 5 7.00 98年 2 6 7.50 98年 2
柱温箱温度	40ºC
自动取样器温度	15ºC
注入量	10μL
流	0.5毫升/分钟
运行时	7.5分钟
ESI电压(+ Ve)	5300年
干燥气体	110年
喷雾器气体	300年
源温度	300年
HSID温度	220年

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试剂和化学物质

所有CRM,化学试剂和NIST可追踪的女士和质/年级。本研究还利用1型水。

方法

股票的解决方案和校准标准准备

股票的解决方案是准备10 mg / L(10毫升标准的所有分析物的混合物。这是通过适当的卷从母亲股票10毫升容量瓶之前我发了一个适当的溶剂为每个抗生素分析物。

标准的解决方案都是储存在-20ºC。校准标准由连续稀释工作解决方案(5、10、25、50、100和200 ng / ml)股票的解决方案与水:乙腈(80:20,v / v)。

样品提取过程

• 总共2 g±0.1克样本体重50毫升聚四氟乙烯离心管。
• 总共4毫升的水被添加在此之前在漩涡30秒了,离开30分钟。
• 总共10毫升的乙酸乙酯添加之前这是漩涡了2 - 3分钟,以确保适当的溶剂相互作用和分析物。
• 样品在10000转离心10分钟。
• 总共5毫升的上层清液加入蒸发管和蒸发干燥氮气下蒸发器40ºC。
• 1毫升的样本重组乙腈:水(80:20,v / v)和涡。
• 示例0.2µm滤纸过滤。

结果和讨论

线性的研究涵盖了浓度水平的200µgµg / L / L通过六个校准点。方法展示了出色的线性度与R²> 0.99牛奶中的抗生素研究矩阵。量化的限制(定量限)10µg / L的所有抗生素。

表1显示了LC方法&女士源参数,而表3显示了TMRM模式转换的研究抗生素。

表2。基体效应。来源:PerkinElmer食品安全和质量

被分析物	溶剂性病。	Matrix-matched区域。	我%
Sulfamethoxypyridine	50655年	80960年	60
磺胺噻唑	38731.8	43709年	13
Sulfadiazin	10873.6	43955.7	304年
磺胺嘧啶	18719.4	56815年	204年
Sulfamethizole	76718.8	122715年	60
Sulfachloropyridazine	72406.6	111414.3	54
Sulfaisoxazole	94119.2	154994.2	65年
Sulfaquinoxazole	30548.2	37611.5	23
磺胺喹喔啉	29353年	37376年	27

表3。MRM转换和分析物的保留时间。来源:PerkinElmer食品安全和质量

被分析物	前体	产品1	公元1	产品2	公元2	RT
Sulfamethoxypyridine	281年	156年	-23年	65年	-78年	3.68
磺胺噻唑	256年	156年	-20年	65年	-73年	6.07
Sulfadiazin	251年	156年	-22年	108年	-34年	3.08
磺胺嘧啶	250年	156年	-22年	184年	-23年	3.24
Sulfamethizole	271年	156年	-19年	92年	-41年	3.50
Sulfachloropyridazine	285年	156年	-20年	108年	-38年	3.76
Sulfaisoxazole	268年	156年	-19年	113年	-20年	3.95
Sulfaquinoxazole	301年	156年	-23年	92年	-48年	4.15
磺胺喹喔啉	301年	156年	-23年	208年	-25年	2.15

基体效应

反应matrix-matched标准(pre-extraction飙升的峰面积)比较对相应的溶剂峰地区的标准。这样做是在6个复制。

这个过程使基体效应(我)量化的平均峰面积的百分比抑制或增强使用矩阵的面积标准和溶剂的面积标准(表2),负我值表明matrix-induced信号排除,而正值表示信号增强。

恢复研究

所有化合物的复苏是由飙升,10点25到50µg /公斤级在牛奶样品在6个复制。

恢复所有分析物被发现在80%和120%之间,而比例相对标准偏差对所有化合物被发现在20%以下,可接受的值是符合监管要求。

表4、5和6代表三级复苏恢复比例和相对标准偏差。数据分析在六个复制完成后最终稀释系数的计算。

表4。恢复10点μg /公斤飙升5倍稀释在实际的高峰。来源:PerkinElmer食品安全和质量

被分析物	Rec 1	Rec 2	Rec 3	Rec 4	Rec 5	Rec 6	Avg	方差	%相对标准偏差	%的复苏
Sulfamethoxypyridine	10.73	10.61	10.61	10.00	10.60	10.89	10.57	0.30	2.88	105.72
磺胺噻唑	10.60	9.39	8.98	7.92	6.88	7.73	8.58	1.34	15.58	85.83
Sulfadiazin	9.51	8.84	9.38	10.97	10.10	9.16	9.66	0.76	7.92	96.60
磺胺嘧啶	10.05	8.33	9.54	10.55	8.86	9.56	9.48	0.80	8.42	94.81
Sulfamethizole	10.25	9.88	9.95	9.28	9.10	8.94	9.57	0.53	5.52	95.65
Sulfachloropyridazine	10.86	10.27	10.75	10.06	10.48	10.54	10.49	0.30	2.83	104.94
Sulfaisoxazole	10.29	10.39	10.08	9.81	9.81	9.93	10.05	0.25	2.45	100.53
Sulfaquinoxazole	10.42	10.31	10.39	9.27	9.19	9.92	9.92	0.56	5.64	99.16
磺胺喹喔啉	10.41	10.35	10.71	9.67	9.81	10.63	10.26	0.43	4.19	102.64

表5所示。复苏25μg /公斤飙升5倍稀释在实际的高峰。来源:PerkinElmer食品安全和质量

被分析物	Rec 1	Rec 2	Rec 3	Rec 4	Rec 5	Rec 6	Avg	方差	%相对标准偏差	%的复苏
Sulfamethoxypyridine	26.00	26.84	26.07	19.43	18.88	19.35	22.76	3.89	17.11	91.04
磺胺噻唑	21.19	20.56	23.42	22.02	22.80	21.75	21.96	1.04	4.75	87.83
Sulfadiazin	24.78	24.87	23.56	22.85	21.04	21.84	23.16	1.55	6.69	92.63
磺胺嘧啶	25.99	27.17	28.12	22.12	21.31	23.61	24.72	2.79	11.27	98.88
Sulfamethizole	24.29	24.83	24.69	17.75	17.86	17.47	21.15	3.79	17.92	84.60
Sulfachloropyridazine	26.18	26.12	26.49	19.90	19.55	19.31	22.93	3.67	15.99	91.70
Sulfaisoxazole	25.94	26.04	26.06	18.64	18.46	18.93	22.35	4.02	18.00	89.39
Sulfaquinoxazole	26.54	26.41	25.50	18.67	18.18	19.83	22.52	4.03	17.88	90.08
磺胺喹喔啉	24.80	25.24	25.31	18.85	18.99	17.89	21.85	3.61	16.51	87.38

表6所示。复苏50μg /公斤飙升5倍稀释在实际的高峰。来源:PerkinElmer食品安全和质量

被分析物	Rec 1	Rec 2	Rec 3	Rec 4	Rec 5	Rec 6	Avg	方差	%相对标准偏差	%的复苏
Sulfamethoxypyridine	47.45	48.29	48.24	53.66	54.03	54.35	51.00	3.32	6.50	102.00
磺胺噻唑	55.00	58.66	57.69	46.03	42.92	44.31	50.77	7.12	14.03	101.54
Sulfadiazin	50.20	50.65	49.93	52.42	53.82	53.27	51.71	1.67	3.23	103.43
磺胺嘧啶	47.09	53.56	48.14	41.95	47.72	49.41	47.98	3.75	7.82	95.95
Sulfamethizole	48.12	49.35	48.48	56.60	56.17	56.57	52.55	4.29	8.17	105.10
Sulfachloropyridazine	48.23	49.33	47.41	55.44	54.52	54.99	51.65	3.71	7.18	103.31
Sulfaisoxazole	49.05	48.30	47.64	56.79	54.55	55.72	52.01	4.11	7.91	104.01
Sulfaquinoxazole	49.91	47.25	47.99	55.20	54.52	54.91	51.63	3.67	7.10	103.26
磺胺喹喔啉	48.85	48.02	48.46	54.06	54.54	56.22	51.69	3.64	7.04	103.38

结论

本研究获得的结果在突出QSight™质/ MS方法的有效能力,常规抗生素分析牛奶。结果表明优秀的色谱可重复性。样品分析物被确定通过预选赛和积极的确认,并量词离子比率。

快速、可靠UHPLC-MS / MS方法设计同时牛奶中磺胺类药估计矩阵。定量限的所有分析物被发现10µg /公斤,而线性被发现在5毫克/公斤和200毫克/公斤的回归系数> 0.99。

使用这种方法的定量限获得自信地低于监管水平,表明PerkinElmerQSight™220质/ MS系统是一个敏感的和健壮的平台适合牛奶中磺胺类药物的分析。

引用

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确认

从材料最初由Narayan 亚博网站下载Kamble博士卡纳斯Gavhane Umesh Talekar,博士从PerkinElmer(印度)分公司。

这些信息已经采购,审核并改编自PerkinElmer食品安全和质量提供的材料。亚博网站下载

在这个来源的更多信息,请访问PerkinElmer食品安全和质量。