分析兽药的鸡

准备样品的时间和步骤已经在任何一个始终存在的问题分析方法用来确定食品的化学残留物。

在每一个多层次,multi-residue方法(嗯),一直有一种之间的权衡降低基体效应引起的清理样品和一些分析物的损失在清理(低复苏)。

使用的清洁步骤数量越大,越大的时间和成本,更高的潜在分析物的数量的过程中丢失。少或没有样本清理将导致更多的样品基体效应和更高的维护需要的时间和成本。

Lehotay集团从美国农业部(USDA)发表了无数的论文嗯在动物性食品中兽药。^{9、10、11、12、13、14}

集团的牛肾脏参与测试和比较研究六嗯可以从文学。发现每个方法执行相对,虽然一些方法比其他一些药物类工作。没有适合所有药物类别评估方法,然而。⁹

实验产生的样本显示,下面的方法做了一个快速、简单、有效的样品制备方法:一个5分钟的2 g的均质肾10毫升的4/1 (v / v)乙腈/水,其次是同时清理提取的0.5 g C18和10毫升己烷。

这项研究还评估不同的吸着剂分散固相萃取(d-SPE)清理,包括:

• Aminopropyl
• 高分子吸附剂ENV +
• 炭黑

观察到,虽然吸着剂调查导致更好的清理矩阵组件,它们也造成的更大数量的样品中的分析物相比,使用C18。

其他研究强度的实用方法,超过100种药品牛肌肉,¹¹涉及的测试当时d-SPE吸着剂Z-Sep Z-Sep +,结合使用C18和节流C18。

九个不同清理条件的不同组合不同d-SPE与己烷和/或分区进行了研究。

而利用Z-Sep +和Z-Sep +己烷可能提供消除基质成分的有效手段,也大大降低了复苏的许多药物研究。

最合适的妥协的平衡矩阵的影响和分析物复苏实现利用节流C18 +己烷。

在最近的研究中,^{12 - 14}组不使用己烷清理由于苯基丁氮酮,oxyphenylbutazone和其他药物,不亲水部分划分为己烷。这导致了较低的和可变的复苏。

集团最近测试被称为“强化矩阵清除脂质”(EMR-L)。EMR-L是一个新产品要有选择地去除脂肪蛋白质和脂类食物样本(例如,动物食品)。¹³

结果表明,EMR-L方法提供更清晰的提取和成果改进一些极性化合物,包括镇静剂和驱肠虫剂相比,使用C18 d-SPE方法。

EMR-L方法证明了低得多的复苏β-lactam抗生素和一些极性药物,然而。

应该指出的是,EMR-L C18 d-SPE相比方法需要额外的步骤。对于四环素、低复苏得到C18 d-SPE和EMR-L样品制备方法。

利用稳定同位素标记对四环素是建议在样品制备赔偿损失。^8、12在实践中,使用C18 d-SPE方法更快、更简单、更比EMR-L有成本效益的方法。

即使在实例的节流C18 d-SPE清理工作,大约75%的药物研究显示经济复苏在70 - 120%。少一些极性药物仍可保留的部分在C18吸附剂在水ACN提取d-SPE期间,导致较低的复苏。^{12 - 14}

并不是每一个极矩阵组件和干扰可以被任何清理方法研究到目前为止。

这意味着对于嗯最合适的方法来减少基体效应和减少维护需求包括最终样本提取的稀释或注入一个体积小的样品列。^{11、12、14、22、23}这也可以提高早期淋洗极性分析物的色谱法。

最近的增长在现代高度敏感的质谱仪的商业可用性和快速极性切换意味着这种方法现在是一个可行的选择分析超过100兽药样品没有清理。¹⁴

新LC / MS / MS系统的增强灵敏度帮助消除耗时的步骤(溶剂蒸发、浓度和调整),被要求达到先前的嗯,利用仪器的检测限制不太敏感。^{7 - 11}

正常做法是过滤样品提取之前信用证分析(尤其是UHPLC应用程序)不同过滤材料应该仔细评估,以避免污染过滤器或分析物的风险损失由于吸附在过滤器上。亚博网站下载

前面的研究^{9、10、11、12、13所示}Lehotay集团进行评估的四种不同类型的过滤器。它发现一个polyvinylidenefluoride (PVDF)过滤器提供最佳的整体性能。

应该注意的是,该组织还发现,虽然过滤并过滤掉一些药物分析物,它还介绍了潜在的信号增强基体效应和干扰组件在样本矩阵。^9、12、14

Lehotay研究者选择删除清理和过滤步骤完全从他们的最新方法。采用现代仪器和注入样品的体积小,显示增加的分析范围,而不干扰方法性能和维护的需要。¹⁴

在这项研究中,不同的样品制备方法进行进一步评估。

复苏的研究是由飙升的分析物样品在两个浓度水平(0.5倍和1倍)。复苏相比,计算峰面积的强化和样品matrix-matched校准曲线。

分析物的平均回收率介于70%和120%之间(表3)RSD < 20%对于大多数分析物的研究,分析了提取直接没有清理。

平均恢复多个类的分析物被发现后低d-SPE使用2007.01采用AOAC公认的清理工具清理(MgSO4 1200毫克,PSA 400毫克和C18 400毫克)。其中包括氟喹诺酮类原料药、四环素和一些镇静剂。

类似的结果也获得了在使用节流C18 d-SPE吸着剂。这些结果发表的结果有很好的一致性。^{8、9、10、11、12、13所示}

结果当使用Z-Sep +吸附剂在这里不包括d-SPE清理步骤,因为他们发现与发表的结果。¹¹

线性,精度和量化标定完成于极限matrix-matched(毫米)和reagents-only (RO)标准0,0.1 x 0.2 x 0.5 x, 1和2 x。

X代表监管公差或限制(表3),相当于样品浓度与重复注射的每个标准都分散在UHPLC / MS / MS序列。

校准曲线由RO和鸡肉样品矩阵具有良好线性相关系数(R²)大于0.99(图2和图3显示特性校正曲线的例子)。

图2。5-hydroxy-thiabendazole hydroxyl-dimetridazole校正曲线(A) (B)、萘夫西林(C)和双氯西林(D)获得标准准备试剂只(分析物浓度范围从0.1到2 x)。图片来源:PerkinElmer食品安全和质量

图3。5-hydroxy-thiabendazole hydroxyl-dimetridazole校正曲线(A) (B)、萘夫西林(C)和双氯西林(D)获得标准准备鸡肉样品矩阵(分析物浓度范围从0.1到2 x)。图片来源:PerkinElmer食品安全和质量

评估结转完工后通过注入试剂空白2 x标准。没有结转指出在任何实验。具备良好的精度的方法还发现相对标准偏差小于20%的几乎所有的药物研究。

量化的估计方法的限制(定量限)浓度与信号噪声比(S / N) 10。所有定量限药物调查被发现是0.5倍以下公差范围或最大残留水平(MRLs)。

结果表明,该方法非常适合多层次兽药残留的快速筛选和量化在鸡肉样品。

样品分析

开发方法应用分析兽药在五个鸡强化内部标准样品。没有一个研究药物检测的基础上,保留时间和质谱信息(两个MRM转换)相比,相应的参考标准。

结论

分析方法开发兽药在动物组织是特别具有挑战性由于复杂矩阵的患病率与大量的脂肪,脂肪和蛋白质。感兴趣的分析物残留特别不同,来自不同阶层和一系列的化学和物理性质。

样品制备是许多成功的基石的方法对色谱法由于其影响,电离和质谱分析。

样本清理嗯更具挑战性,但是,因为这个过程会导致分析物损失,显示的结果与d-SPE清理在以前的出版物和研究。

分析尽可能多的分析物,必须确保足够的分析物之间达成一个平衡恢复和减少样本矩阵的影响。

增加商业可用性和进步在高度敏感的仪器可以看到dilute-and-shoot方法成为最有效的方法来减少MEs同时最小化仪器维护需求和提高色谱分析物的嗯。

这里的研究强调了潜在的具有成本效益的嗯兽药分析鸡。

这种方法涉及耦合UHPLC系统220 QSight triple-quad质谱仪,高度适合的快速筛选和分析超过70兽药鸡。该方法还拥有自信地定量限低于监管机构所强加的限制。

结果从几个样品制备方法说明一个简单的直接注入法没有样本清理所有化合物研究提供最佳的整体复苏,尽管它是指出样本矩阵可以影响分析柱的一生。

它保持干净,QSight 300系列质谱仪离子源使得敏感的理想选择用户希望减少基体效应和提高方法鲁棒性通过使用更多或更少的样品稀释样品注射同时确保没有对方法的检测能力的影响。

引用

1. 最大残留限量(MRLs)和风险管理建议(RMRs)兽药残留的食物。CAC /推广2 - 2017。更新在第40届食品法典委员会(2017年7月)。http:// www.fao.org/fao-who-codexalimentarius/sh-proxy/en/?lnk = 1 url = https % % 252 f % 252 253 fworkspace.fao.org % 252 Fsites % 252 fcodex % 252 fstandards % 252 fcac % 2 bmrl fmrl2e.pdf % 2 b2 % 252。2018年4月13日通过。
2. 最大残留限量的列表(MRLs)食品中兽药,加拿大卫生部,2017年8月。https://www。加拿大。ca / en /加拿大卫生部/服务/ drugs-health-products /兽药/ maximum-residue-limits-mrls / list-maximum-residue-limits-mrls-veterinary-drugs-foods.html。2018年4月13日通过。
3. 的中华人民共和国农业部公告第235号最大残留限量的兽药在动物衍生食品,2002年。注意:农业部已经完成了修订“MRLs的兽药在动物食品”,但尚未正式公布新修订的版本。
4. (EC) 1308/1999号理事会条例1999年6月15日修改监管(EC) 2377/90号放下一个社区程序建立最大残留限量兽医医药产品在动物源食品。https://ec.europa。欧盟/健康/网站/健康/文件/文件/ eudralex / vol-5 / reg_1999_1308 reg_1308_1999_ en.pdf。2018年4月13日通过。
5. 美国食品和药物管理局。21 CFR头衔——食品和药品,556年,公差新的动物药物残留的食物。2015年。https://www.accessdata.fda.gov/scripts/cdrh/cfdocs/cfcfr/cfrsearch.cfm?cfrpart=556。2018年4月13日通过。
6. 美国农业部食品安全及检验局。化学实验室指南。https://www.fsis.usda.gov/wps/portal/ fsis /主题/科学/亚博老虎机网登录 laboratories-and-procedures / guidebooks-and-methods / chemistry-laboratory-guidebook。2018年4月13日通过。
7. Bigwood存根,G, T)的开发和验证一个多层次液相色谱串联质谱(质/ MS)程序的决心使用QuEChERS兽药在动物组织中残留的方法。肛交。詹。学报2009,637,68 - 78。
8. Dalmia, a PerkinElmer应用注释(01288)、决心、确认和多层次牛奶中抗生素残留的定量UHPLC MS / MS。
9. Lehotay SJ Lightfield AR Geis-Asteggiante L,施耐德MJ, Dutko T, Ng C, et al。开发和验证设计的简化方法检测62兽药的残留牛肾使用超高液相色谱-串联质谱分析。药物测试肛门。2012;4 (5。1):75 - 90。
10. 施耐德MJ, Lehotay SJ, Lightfield AR。评价的多层次,multi-residue液体chromatography-tandem质谱方法分析120年兽药牛肾脏。药物测试肛门。2012;4(增刊。1):91 - 102。
11. Geis-Asteggiante L, Lehotay SJ Lightfield AR Dutko T, Ng C,布鲁姆L .强度测试和验证的实用分析方法> 100年兽药残留牛肌肉超高液相色谱-串联质谱分析。J Chromatogr a . 2012;1258:43-54。
12. 施耐德MJ, Lehotay SJ, Lightfield AR,验证一个精简的多层次multi-residue方法测定牛肌肉兽药残留的液相色谱串联质谱分析。肛门Bioanal化学2015;407:4423-35。
13. Anumol T, Lehotay SJ,史蒂文斯J, Zweigenbaum J .兽药残留的比较结果在动物组织超高液相色谱三重四极或quadrupole-time-of-flight耦合串联质谱在不同的样品制备方法,包括使用商业脂质清除产品。肛门Bioanal化学2017;409:2639-53。
14. Lehotay SJ, Lightfield AR。同时分析氨基糖甙类与其他类药物残留的牛组织UHPLC-MS /女士使用离子对试剂添加到最终的提取。肛门Bioanal化学2017;410 (3):1095 - 1109。
15. 洛佩斯,RP,雷耶斯,RC、Frenich AG) Multi-residue兽药在水产养殖鱼类样本测定超高液相色谱法耦合串联质谱,j . Chromatogr。895 - 896 B, 2012年,39-47。
16. Dasenaki,我,Thomaidis, NS, Multi-residue决心115兽药和药物残留的奶粉、黄油、鱼组织使用液体chromatography-tandem质谱和鸡蛋,肛门。詹。学报。2015、880、103 - 121。
17. 阴,ZQ、柴、TTμ,PQ,徐,NN,歌曲,Y,, X,, Q, 210年秋,J, Multi-residue决心药物猪肉的超高性能的液体chromatography-tandem质谱分析。j . Chromatogr。2016年,1463年,49-59。
18. Dasenaki,我,Michali、CS、Thomaidis, NS。分析76年的兽医药品从13类包括牛肌肉由亲水性氨基糖甙类交互液体chromatography-tandem质谱分析。j . Chromatogr。,2016,1452,67 - 80。
19. 摩尔HGJ Berendsen BJA,梅耶尔T, van ginke L, Nielen MWFA。全球实验室内部研究评估收购模式出发确认分析兽药使用液相色谱三重四极耦合,orbitrap和飞行时间质谱分析。肛交。詹。学报。2017;962:60 - 72。
20. PerkinElmer Technical Note (013093 - 01): QSight StayClean HSID技术。http://www.perkinelmer.com/lab-solutions/resources/docs/TCH_QSight_StayClean_HSID_技术(013093)_01 . pdf。
21. 欧洲委员会,SANCO。2015年。指导文件分析质量控制和农药残留分析方法验证过程在食品和饲料,桑特/ 11945/2015https://ec.europa.eu/food/sites/food/files/plant/docs/pesticides_mrl_guidelines_wrkdoc_11945.pdf。
22. Stahnke H, Kittlaus年代,肯普G,桤木l .减少基体效应的液体chromatography-electrospray电离质谱的稀释样本提取:稀释需要多少钱?肛交。2012年化学,84:1474 - 1482。
23. Krynitsky, a . j . Wong j . w .张k和Safarpour h .关注食品分析:重要考虑开发可靠的分析时对基体效应残留方法使用质谱,LCGC北美,2017年,35卷,7号,444 - 451。

确认

从材料最初由Jingcun吴亚博网站下载,乔希,伊拉斯谟Cudjoe,和冯秦PerkinElmer公司。

这些信息已经采购,审核并改编自PerkinElmer食品安全和质量提供的材料。亚博网站下载

在这个来源的更多信息,请访问PerkinElmer食品安全和质量。