发光成像实验:探测器的作用

基于发光的遗传报告系统是特殊的敏感性,广泛用于研究细菌,植物和体内小动物的体内研究的基因表达。利用荧光素酶的系统能够促进复杂生物系统中的转录中的微小变化的准确定量。

与荧光中发现的信号相比,这些信号非常微弱。然而,背景本身就很低。虽然自体荧光易于干扰和掩盖信号信息,但当使用荧光时不会发生这种情况。

也避免了通常由光照引起的正常细胞过程的扰动。发光提供比使用传统方法更详细地揭示转录规则的能力。

iKon-M深冷CCD相机是一种常用的发光成像工具。示例设置可能使用温度控制光密封室的工厂成像,高通量板格式或微流体系统。

iKon-M深冷CCD相机广泛应用于发光成像。在这个例子中,在一个温控光密封室中进行植物成像。许多使用高通量平板格式或微流体系统的其他设置也在使用中。

iKon-M深冷CCD相机广泛应用于发光成像。在这个例子中,在一个温控光密封室中进行植物成像。许多使用高通量平板格式或微流体系统的其他设置也在使用中。图片来源:安铎科技有限公司

生物发光研究提供了一系列的好处,但也带来了一系列的检测挑战。这些检测挑战不同于典型荧光显微镜成像的常见挑战。下面概述了其中一些挑战。

灵敏度

发光反应仅产生有限数量的光子。因此,它是必要的,使用中的检测器提供最大灵敏度,以便随着时间的推移捕获发射的光子。这将允许检测器生成有用的信号。

超低噪音

信号会很弱,所以将背景噪声保持在尽可能低的水平是很重要的。曝光10分钟或更长时间,确保测量的“暗电流”有限。

因此,检测器必须提供最低可能的暗电流 - 最小化可能在相机传感器内积聚的任何自生成的热噪声。

定量准确性

促进分析,表达或细胞信号传导途径的转变具有潜在的差异,具有微妙的重要差异。良好的探测器应该能够区分这些差异以更好地阐明阐明实验数据。

动态范围

在同一图像中捕获低电平和高级信息需要宽动态范围的可用性。

技术解决方案

深冷CCD相机为发光实验提供了理想的解决方案,CCD相机提供的暗电流比快速sCMOS相机低1000->倍。对于长时间曝光(通常长达数分钟)来说,对CCD进行深度冷却以消除暗电流是必不可少的。

CCD摄像机包括具有高量子效率的传感器选项,促进了一系列发光报道系统的宽量响应。具体型号还提供宽的动态范围和定量测量所需的高线性度。

iKon-M深冷CCD相机由于最低可能的暗电流和低读取噪声的组合,提供最低的背景噪声。由于仪器的超低背景结合了高量子效率(QE),确保了高灵敏度。

在使用更长的曝光时,IKON-M CCD的性能变得特别明显。

iKon-M深冷CCD相机提供了最低的背景噪声,由于低读噪声和最低可能的暗电流的组合。这种超低本底与>90%的高定量相结合,可获得最佳的灵敏度。iKon-M CCD的性能在长曝光时尤其明显。

iKon-M深冷CCD相机提供了最低的背景噪声,由于低读噪声和最低可能的暗电流的组合。这种超低本底与>90%的高定量相结合,可获得最佳的灵敏度。iKon-M CCD的性能在长曝光时尤其明显。图片来源:安铎科技有限公司

iKon系列:用于植物发光成像的Andor相机解决方案

最具挑战性的发光实验由安多尔的iKon CCD相机系列——目前最灵敏的CCD相机——简单完成。

独有的UltraVac™永久真空技术和稳定、高效的热电冷却至-100°C,是相机行业领先性能的核心。

iKon CCD相机可以将暗电流驱动到可能的最低水平,QE高达95%,确保最高灵敏度。一个c安装配件允许iKon-M CCD模型耦合到显微镜或镜头时,作为自定义光学设置的一部分。

ikon-m用于发光的要求和益处

iKon-M CCD相机提供了一系列的好处,当使用发光实验。

荧光素酶活性的微弱光子发射信号检测

iKon-M CCD相机捕捉到每一个可能的光子,这要归功于它的>90% QE在大多数荧光素酶的发射波长范围内。

13µm像素尺寸确保了光子收集和高分辨率的平衡,1024x1024传感器格式确保与行业标准c-mount镜头格式的兼容性。这导致了增强的光子探测和加速的实验吞吐量。

延长时间测量与分钟的曝光

行业领先的冷却低至-100°C允许ikon-m提供尽可能低的暗电流。

即使是20-30分钟的长时间曝光,也可以达到最佳的信噪比和最低的噪声下限。在尽可能低的背景下保证了信号的有效分离。

记录准确的生理学

卓越的灵敏度与异常的定量准确性相结合,这意味着有可能发现转录水平上的微妙影响,例如,由于昼夜节律的变化。这允许用户对他们的数据保持最大的信心。

量化弱和高水平信号在一个单一的图像

由于最高130000 e的信号处理能力,确保了宽动态范围。可以同时量化高电平信号和低电平信息,在实验设计中提供有形的益处,并在单个实验中提供宽信号水平

因此,用户能够在一张图像中获得准确的生理数据。

质量和寿命

IKON-L提供了5年的保证Ultravac™真空传感器外壳.永久真空过程是很好的证明,这是至关重要的冷却和保护背光传感器冷凝水和水分。这些因素结合起来确保了持续的高性能。

单细胞生物发光成像

当从典型的发光实验转向单细胞水平的研究时,甚至可能需要更高的灵敏度。iXon EMCCD系列是这些研究的理想选择。

参考文献

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    和或科技有限公司. .(2021年,07年5月)。发光成像实验:探测器的作用。AZoM。于2021年10月14日从//www.washintong.com/article.aspx?ArticleID=20392检索。

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    和或科技有限公司. .“发光成像实验:探测器的作用”。AZoM。//www.washintong.com/article.aspx?ArticleID=20392。(2021年10月14日生效)。

  • 哈佛

    Andor Technology Ltd .. 2021。发光成像实验:探测器的作用.Azom,查看了2021年10月14日,//www.washintong.com/article.aspx?articled=20392。

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