色谱:监测单克隆抗体突破曲线

拉曼光谱法是一种非破坏性分析技术,可用于测量化学键振动的频率。

由于这些在键周围的精确化学环境中发生的特定能量发生,因此对不同频率的调查也可用于“指纹”不同的化学化合物,即使是复杂的化学物种,包括单克隆抗体。

拉曼光谱法可以用于量化确认所需产品生产的杂质水平。制备单克隆抗体的主要挑战之一通常是在纯化过程中使用色谱法时。

在这一阶段的效率低下和复杂性通常是昂贵的。这就是为什么单克隆抗体的疗法部分成本更高的原因。2

纯化问题

为了获得有限的污染物,对色谱分离过程的良好控制是必要的。这意味着与产品洗脱相关的色谱峰与所有其他化合物均锐利。

对于将综合扩展到工业水平的扩展,减少尽可能多的柱分离所需的总时间是关键,就像建立可以在连续系统中执行合成和纯化的方法和程序一样。3

作为过程增强的一部分,适当监视的属性之一是列的突破性曲线。

突破性曲线确定列何时完全饱和,或何时目标输入化合物的量(例如,未覆盖的单克隆抗体)等于退出柱的抗体量。

这是添加到列中的其他材料基本上会导致产品损失以及最有效地利用列的时刻。突破性曲线的原位监测对于优化色谱抗体纯化至关重要。

具有这种能力的系统的渐进设计是正在进行的研究的主题:例如,苏黎世化学与生物工程研究所的研究人员与物理建模一起使用了拉曼光谱,以开发样品输送系统,以监测单克隆抗体突破性曲线的样品输送系统色谱柱。4

Multispec拉曼系统。

Multispec拉曼系统。图片来源:TEC5USA INC

Tecraman探针785比色杯。

Tecraman探针785比色杯。图片来源:TEC5USA INC

地狱流通式比色绿色。

地狱流通式比色绿色。图片来源:TEC5USA INC

高性能拉曼光谱

拉曼信号可能很弱,在使用拉曼光谱进行样品分析时,这会带来挑战。

苏黎世的研究人员通过将拉曼分析仪与扩展的卡尔曼滤波器方法相结合 - 一种算法通过合并统计数量来通过合并一段时间内进行的多个测量值来估算统计量,从而解决了这一问题。

高性能拉曼系统的下一代(包括Multispec Raman System(Versatile R&D系统)和CompactSpec II过程Raman光谱仪为高风险位置开发了TEC5USA,包括Multispec Raman System(多功能R&D系统)和CompactSpec II工艺光谱仪,可以促进此类分析。光谱学的全球领导者。5&6

MultiSPEC使用600μm纤维进行高光学吞吐量。精确和高级光学的使用是准确的拉曼光谱法 - 多运动系统利用温度稳定的785 nm激光器与VPH传输光栅结合使用。

该系统限制了流浪光,允许出色的空间均匀性,并且具有非常低的传输波前误差。

由1 MP/S 16位广告转换提供动力,TEC5USA硬件可快速获取。实时数据处理可用于个性化控制程序或进行广泛的平均和平滑,以提高测量精度。

总体结果是一个系统,其能力可以准确地监测抗体突破曲线,同时允许优化色谱抗体纯化过程。

TEC5USA的光谱系统具有许多特殊功能,从而实现了这种分析。它们的内联光谱仪具有适应性和可扩展性,提供了一系列外壳,电子和探针以适应应用。

它们的光谱仪也非常健壮,适合在极端温度和压力条件以及其他严峻的工业环境中使用。TEC5USA系统配备了最新一代的分析和数据采集软件MultisPec Pro II。

TEC5USA光谱溶液

除抗体测量和优化溶液外,TEC5USA还可以在拉曼,UV-VIS,NIR和LIBS光谱中提供广泛的各种产品和专业知识。这包括高速,移动光谱设备以及用于工业过程控制的几种解决方案。

在TEC5USA作为OEM和高级工业系统设计师和制造商的丰富经验中,过程评估和定制解决方案也是可能的。

大多数从事疫苗和抗体开发的生物技术公司都需要可靠的无损,快速样本识别,因此不会浪费重要的样品。

拉曼光谱学已经是用于此类应用的一种经常使用的过程分析技术,但是对于大量实验室,必须将光谱仪与现有工作流程集成在一起,以避免昂贵的重新设计和升级。

这正是该系统的原地或直列测量系统所采用的类型,也是为获取有关反应状态的重要数据的加速途径。

过程自动化理想地要求以在线格式进行非侵入性,准确的测量;TEC5USA的系统已在一系列应用中成功使用,包括微通道中的反应监测和细胞培养的生物处理监测。

TEC5USA系统的主要优点之一是拉曼设置的高稳定性,使得能够准确识别浓度最小的变化,无论是浸入探针是必需的还是仅仅是流动细胞以通过样品传递激光束。

有可能自定义分光光度计设备的配置和涵盖光谱的许多方面的广泛投资组合,TEC5USA是用于任何应用的光谱的最佳选择。7

参考

  1. BCC研究(2020)拉曼光谱市场,https://www.bccresearch.com/ market-research/instrumeation-and-sensors/raman-spectroscopy-markets-report-ias110a.html,2020年5月8日访问
  2. Liu,J。K. H.(2014)。单克隆抗体发展的历史 - 进步,剩余的挑战和未来的创新。医学和手术年鉴,3(4),113–116。https:// doi。org/10.1016/j.amsu.2014.09.001
  3. Kelley,B。(2007)。非常大规模的单克隆抗体纯化:常规单位操作的情况。生物技术进度,23(5),995–1008。https://doi.org/10.1021/ bp070117s
  4. Feidl,F.,Garbellini,S.,Luna,M.F.,Vogg,S.,Souquet,J.,Broly,H.,…Batté,A。(2019年)。结合机械建模和拉曼光谱法,以监测抗体色谱纯化。过程,7(10)。https://doi.org/10.3390/pr7100683
  5. TEC5USA(2020)拉曼光谱,https://www.tec5.com/en/your-application/拉曼,2020年5月8日访问
  6. TEC5(2020)多规格拉曼,https://www.tec5.com/en/products/spectrometersystems/multispecregnbspramannbspsysty,2020年5月8日访问
  7. TEC5USA(2020)产品,https://www.tec5.com/en/products,2020年5月8日访问

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