使用断层扫描的主要睫状体蛋白酶

断层扫描经常使用并被认为是生命科学结构研究的关键组成部分亚博老虎机网登录1,2。在这里,进行断层扫描的应用以协助准确诊断原发性睫状体蛋白酶(PCD)。

PCD属于一系列基因上异质疾病的动机纤毛,然而,在很大程度上,在很大程度上还包括编码睫状体葡萄球菌的基因中的突变3.

通常,在诊断疑似PCD的情况下,工作流程需要扫描巨大的塑料树脂嵌入和/或大面积的塑料树脂嵌入和传统上染色的薄片,同时搜索通过纤毛的轴向横截面,从中进行诊断。纤毛的几乎完美轴向截面的相对较低的外观有动力调查和问题,可以将断层扫描应用于该领域并有助于加速诊断?虽然断层扫描以前已应用于PCD4.,它尚未在应用中作为标准诊断工具建立。

来自培养的人类受试者和患PCD的患者的培养上皮细胞的标本浸入2%多聚甲醛中,用2%的戊二醛和0.5%磷酸盐缓冲蛋白鞣酸;已知最适合稳定和修复微管结构。进行乙酸铀酯和柠檬酸铅的银段后染色以进行显微镜检查。断层扫描是使用a进行的JEOL JEM-1400透射电子显微镜使用Serialem以120 kV运行,以获得倾斜系列(+/- 60°,以1.5-2°间隔)5.。使用IMOD执行倾斜系列的后续处理6.

直观的上皮刷边界健康(左)和PCD-Afflicty个人(右)的视图。

图1。直观的上皮刷边界健康(左)和PCD-Afflicty个人(右)的视图。

图1展示了一系列来自纤毛的健康和PCD案例的上皮刷边界的一系列图像领域。通常,来自倾斜系列的直视视图的字段对于准确的诊断是不够的,因为纤毛将无法揭示原始典型的模式。

健康个体夜晚(左)的纤毛重建的特写镜头,并倾斜以揭示用于诊断(右)的原型典型视图。选择重建的倾斜,以揭示左上纤毛中的图案。

图2。健康个体夜晚(左)的纤毛重建的特写镜头,并倾斜以揭示用于诊断(右)的原型典型视图。选择重建的倾斜,以揭示左上纤毛中的图案。

图2展示了使用健康个体的倾斜数据产生的三维重建的特写镜头。这种特殊的视图清楚地表明通过几个纤毛瞥了一眼横截面。然而,3D重建可以简单地在计算机中倾斜,以表现出具有明显示出的Dynein臂的连接性的原始典型模式。

如图2所示,但现在来自PCD案例。

图3。如图2所示,但现在来自PCD案例。

同样地,图3示出了PCD案例,在该PCD壳体上,该点分辨率的断开的Dynein臂的重建的倾斜是透明的。应当注意,在少于30分钟的情况下获得数据,并且在30分钟内也可以实现重建,表明1小时内的诊断。该重要数据说明了对诊断PCD案例的应用程序的概念证明。

参考和进一步阅读

  1. 弗兰克,J.,电子断层扫描:用于细胞中结构的三维可视化方法,第2 ED。,Springer,奥尔巴尼,NY(2006)。
  2. McIntosh,JR。,蜂窝电子断层扫描:Cell Biology系列中的方法,Vol。79,elsevier,阿姆斯特丹(2007年)。
  3. Leigh,MW等人,医学遗传学11(2009)473。
  4. O'Toole,E.T.等,microsc。微肿瘤。14(4)(2008)1476CD。
  5. Mastronarde,D.N.,Microsc。微肿瘤。9(4)(2003)1182CD。
  6. Kremer J.R.等,J. STRACH。BIOL。116(1996)71。

致谢

由最初由J. Brink *亚博网站下载和J.L. Carson **撰写的材料生产的材料来自:

* JEOL USA Inc.,Peabody MA 01960

**北卡罗来纳大学在教堂山,教堂山山地山27599。

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    JEOL USA,INC ..(2020年9月14日)。使用分层术进行原发性睫状体缺陷。Azom。从6月24日,2021年6月24日从//www.washintong.com/article.aspx?articled=19600中检索。

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    Jeol USA,INC .. 2020。使用断层扫描的主要睫状体蛋白酶。Azom,浏览2021年6月24日,//www.washintong.com/article.aspx?articleid=19600。

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