成像SEM中生物组织和细胞的表面

扫描电子显微镜（SEM）是强大的放大倍率工具，可利用聚焦的电子光束获得详细的地形，形态和组成数据。过去，样品仅限于固体，无机样品，足够小，可以在中等真空压力下适合腔室内。在本文中，我们将研究设备和技术，以增加现代SEM的实用性，以使生物app亚博体育学家对细胞功能有更多了解。

在SEM中，有多种方法来成像生物组织和细胞，目的是将生物材料尽可能接近其自然状态进行成像，而无需我们对其应用的任何治疗方法引入任何伪像。但是，该材料不能很好地忍受真空，产生低信号，如果需要切割，则倾向于充电并且柔软。

将SEM提升到一个新的水平

可以使用多种技术来对生物组织或细胞的外部进行成像，并为生物学家提供对细胞表面结构的更多见解。在这里，我们将讨论一些可用的方法：

• 负污渍
• 固定，脱水，临界点干，金属涂层
• 使用可变压力和冷阶段
• 冷冻 - 快速冷冻，蚀刻，外套

这些技术中的每一个都利用了不同的检测器，显微镜条件，并为我们提供了对样本的不同看法，以更好地理解外部结构。

负染色

负染色是一种简单的方法，旨在可视化细菌，病毒和孤立的组织细胞等结构。如下图所示，它依赖于样品周围的染色。将细菌或病毒悬浮液放置在透射电子显微镜（TEM）网格上，干燥，然后用重金属染色（例如PTA（磷酸甘油酸）或乙酸铀酰染色，以引入与背景的对比。

将网格放置在多根茎架中，然后使用茎检测器成像。可伸缩的茎检测器插入样品下方，允许明亮的场，暗场和高角度黑场成像。

使用茎检测器成像，直径为80至150 nm，直径为80至150 nm，直径为80至150 nm，染色的流感病毒，通常是球形的或卵形的，直径为80至150 nm

固定，临界点干和涂层

固定，临界点干燥和涂层也是一种众所周知的技术。在这里，样品是用戊二醛固定的，戊二醛在次级固定剂四氧化物前交叉连接蛋白质。四氧化物稳定细胞和细胞器膜脂质。

Osmium也是一种重金属，在有机低原子数材料中极大地有助于对比。接下来是用酒精或丙酮脱水，然后将样品批判性地干燥，然后再用金属（例如金）涂覆。

小鼠胚胎成纤维细胞

可变压力和寒冷阶段

较少使用的方法是使用可变压力和冷阶段成像样品。可变压力或低真空技术允许成功地可视化组织和细胞等非导电样品。

真空中的任何水合样品最终都会变干。通过降解真空，可以降低去除水的速率。当将其与冷阶段结合在一起时，可以通过在三重点上工作来对SEM中的水进行图像。一个考虑因素是，尽管样品未接触任何化学处理，但SEM的真空可以引入伪像。同样，真空越差，信号越弱，通常需要扫描时间。

带有水滴的头发在接近600 pa的情况下成像，冷阶段略低于冷冻

冷冻，快速冷冻和外套

在这种方法中，细胞会迅速冷冻，以使其保持尽可能接近其自然状态。冷冻速率对于避免对细胞的冰晶体损伤至关重要，而冰晶体较小的冰点越快。

可以在包括液氮暴跌或高压冻结在内的一系列方法中实现快速冷冻。一旦细胞被冷冻，它们就可以用金属像金这样的金属涂层，以使它们导电并帮助信号。

在整个涂层和成像过程中，细胞必须保持冷冻状态。这需要在SEM室中的冷冻阶段和一个传输设备，以将样品从快速冷冻设备中输入SEM。

冷冻准备的灰叶（人为颜色）

单细胞的茎检测器

使用茎检测器，电子束聚焦于通常为0.05-0.2 nm的细点，该点在栅格系统中的样品上扫描，并平行于光轴。这使电子探针可以集中精力允许具有子安格斯姆分辨率的图像。

茎成像在生物样品中的优势是环形深色图像的高对比度，它可以允许无需染色的生物样品成像。STEM已被广泛用于解决分子生物学中的许多结构问题。

Vega 3

VEGA3是一种多功能的热发射SEM系统，旨在针对高空和低空白操作，旨在完成广泛的SEM应用。延长的低空白模式允许成像非导电样品，非常适合生物标本，尤其是与冷阶段配对时。

该系统还具有一系列用于不同样本量的室大小，五轴电动阶段以及许多用于未来开发的端口。VEGA3也可以配备用于冷冻操作和转移。

mira 3

MIRA3配置包括一系列室尺寸，具有理想的几何形状，用于低谷和高空作战。它还可以使用大型AMU室进行配置，允许对非凡的大型样品进行SEM分析。MIRA3的腔室配置扩展了系统的分析能力，即使对于超大标本，也可以对样品表面进行精细观察的能力。

该仪器还配备了LE-BSE检测器，该检测器已被优化以提高低能能下的检测灵敏度。该系统还可以配备可伸缩的茎检测器，使明亮的场，深色场和高角度暗场成像以及冷冻阶段和转移系统。

Tescan USA Inc.

Tescan由特斯拉的一组经理和工程师创立，其电子显微镜历史记录从1950年代开始，如今，Tescan是全球著名的聚焦离子束工作站的供应商，扫描电子显微镜和光学显微镜。Tescan的创新解决方案和与客户的合作性质在纳米和微技术领域赢得了领先地位。该公司很荣幸能与一系列科学领域的著名机构一起参加主要的研究项目。Tescan就价值，质量和可靠性为客户提供了领先产品。Tescan USA Inc.是Tescan Orsay Holdings的北美部门，该公司由捷克公司Tescan合并成立，Tescan的合并是SEMS和专注的离子Beam Workstations的全球领先供应商，法国公司Orsay Physics，是定制定制的世界领导者聚焦离子束和电子束技术。

此信息已从Tescan提供的材料中采购，审查和调整。亚博网站下载

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