表面等离子体共振成像(SPRI)是一种技术,可以使用光学实时检测来帮助监测和研究生物分子之间的相互作用,而无需使用标签。它使用成像能力来允许看到整个工作区域并允许多重分析。
多路复用是什么意思?
多重分析是一种可以使用一个Spri-biochip固定的多种配体的分析,以分析多个参数,例如它们的浓度,固定和pH。这为进一步研究和开发的分子的比较,排名和选择增加了方便。
Spri的原理是什么?
SPRI技术旨在测量在Spri-Biochip表面测得的折射率的变化,因为这种变化是质量变化的函数。这可用于实时鉴定分子相互作用,其亲和力以及所涉及的各种分析物的浓度。
收集了什么样的数据?
SPRI技术对生物分子之间的相互作用(包括特异性,反应的动力学和亲和力)的相互作用相当全面,这对于表征相对于分子量的样品溶液非常有用。
可以分析哪些相互作用?
可以以这种方式进行分析的样品包括巨大的碳水化合物,蛋白质和肽,核酸,细胞,细菌,聚合物和小有机分子等。
如何使用SPRI来研究分子相互作用?
图1。通过SPRI监测分子相互作用。
SPRI的实用性在于它能够检测Spri-Biochip表面折射率中发生的变化的能力。这与导致生物分子域的质量积累或结合的任何事件有关。折射率的变化导致共振角度位置的相应移动。如图1所示,随着时间的流逝,随时间的时间监测了以固定角度(称为工作角度)发生的反射率的变化。
在第一步中,配体固定发生在阵列中功能化的spri-biochip的表面上。
在第二步中,将溶解的样品注入流动池中。这启动了分子结合的条件,后者又移动了等离子体曲线,从而增强了反射率。动力学曲线(也称为传感器革)清楚地描绘了反射率在关联阶段的变化。还可以生成SPRI差异图像来监视此相互作用,而白点与Spri-Biochip发生相互作用的地方。
在下一步中,包含样品的溶液从流动池中排出。这导致由配体和分析物形成的复合物解离,从而导致血浆曲线的变化和表面反射率的降低。传感器革兰氏量通过绘制的反射率的变化显示了分离阶段。SPRI差异图像显示了图像上显示为斑点的相互作用区域的变暗。
在最后一步中,已经发生了所有配体 - 分析物复合物的完全解离。如果需要,可以使用再生解决方案来促进这。血浆曲线的返回和动力学曲线从一开始就显示为状态,而SPRI差异图像再次变为黑色。
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