Promegaenniiten®套件在BMG Labtech微孔板读卡器上进行

腺苷5'-三磷酸（ATP）的测量通常用于测定食物中的微生物量。它还可以用于量化血清和组织中的细胞数。Promega enniten^®用于检测ATP的试剂盒使用荧光素酶/荧光素（L / L）来快速量化ATP。L / L催化ATP在560nm处的发光反应，ATP是限制性剂。

ATP + D-Luciferin + O.₂→oomaxucerin + amp +焦磷酸+ co₂+轻的

该实验旨在确定检测的分析极限（LOD）。Promega套件可以检测到下降到10^-16摩尔（0.1 fmol）。有关更多信息，请访问www.promega.com.。

亚博网站下载材料和方法

所有材料都是由陈亚博网站下载述的制造商获得的。

普罗米加·恩利滕酒店^®成套工具，蒸馏水，带注射器的BMG LABTECH微孔板阅读器，微孔板（白色96孔，Costar）

根据需要使用诸如移液管和微离心管的消耗品。

实验

所有分析和试剂均按照Promega的方案制备。确保样品不受污染至关重要，因为ATP通常存在于几乎所有东西中。使用1000 fmol/孔至0.1 amol/孔的系列稀释液，用移液管将ATP溶液移到平板上。测量前，使用微孔板读取器的内置试剂注射器将100µL/L溶液注入每个孔中。使用前，使用10%漂白剂溶液清洗注射器，使其在注射器和管道中放置30分钟。然后，用蒸馏水彻底冲洗管道，以去除漂白剂溶液。

使用以下参数将板插入仪器后，以发光模式读取板：

BMG LabTech读者参数：

。	。
发射过滤器：	空（取决于读者）
读取模式：	好
获得：	3300-3500（取决于型号）
间隔次数：	20.
集成时间：	0.5秒
位置延迟：	1秒钟

绘制了每个浓度的重复测量的平均值和空白测量的平均值之间的差异的曲线图。标准曲线上的线性回归提供了图1和图2中所示的值。

图1。线性数据从100个fmol /孔隙到0.195 fmol /孔。

图2。图1中的扩展范围，0-30 fmol/井。

结果和讨论

ATP试剂盒显示出100毫米/孔/孔/孔/孔的线性性能。数据上的线性回归给出了r²价值0.99859。测量20个空白样品以获得井测量的138 ​​rlus的标准偏差。使用这些参数，lod，loq和r²计算（表1）。

范围	FLUOstar®	灯光癖®
R.2	0.99589	0.99895.
l	0.81 fmol/井	0.20 fmol /井
LOQ.	2.70 fmol/井	0.67 Fmol /井

该套件随附的资源手册说明，它能够从10秒开始测量ATP^-11到10^-16摩尔。计算的数据显示，BMG Labtech微孔板读卡器不仅可以在此范围内执行，而且还可以降低到远下降到更低的检测限，超出线性度普罗米加·恩利滕酒店^®ATP套件。对于FLUOstar/POLARstar仪器系列，使用该套件的ATP的LOD约为1 fmol/孔。这是非常合理的，并且在一般实验室使用的范围内。

由于结果仅来自一种仪器，因此应仅将其视为代表性结果，而不应反映读者的整体情况。然而，它们给出了性能的合理估计，结果可能会也可能不会因不同的工具而有所不同。

本信息来源、审查和改编自BMG LABTECH Ltd.提供的材料。亚博网站下载

有关此来源的更多信息，请访问BMG Labtech Ltd.