使用紫外显微镜识别和定位生长中的蛋白质晶体

由...赞助CRAIC Technologies2017年4月20日

摘要紫外-可见微光谱技术是分析微蛋白晶体的重要工具，目前已广泛应用于药物设计研究、结构生物学、药物生物分离(如胰岛素和药物控制给药系统)等领域。

紫外可见显微镜

Shutterstock |raimundo79.

蒸汽扩散过程，如悬挂或坐滴法，被用来生长大多数蛋白质晶体。然而，盐晶体也经常在这些晶体旁边发现。正常的成像方法很难区分这两种晶体，但蛋白质很容易吸收280 nm的光，并在近紫外光下发出荧光。

虽然蛋白质可以通过成像本征蛋白质荧光从盐晶分化，但该过程非常缓慢并且提供很少的信息，除了易受污染。例如，甚至晶体生长的孔板也可能表现出荧光。另一方面，紫外线微型光谱检查是快速，可靠的，并提供有关晶体的更多信息，例如晶体中的蛋白质浓度。

紫外显微分光光度计

CRAIC Technologies™公司开发了紫外显微分光光度计，如20/20 PV™，可以通过吸光度和荧光显微光谱快速区分蛋白质和盐晶体。

除此之外，当晶体被识别和定位后，紫外显微分光光度计也可以进行鉴定。测试过程是简单的，其中一个微观晶体的光谱是获得。在280nm处，蛋白质晶体强烈吸收光线。如果晶体是盐，它不吸收280纳米的光。此外，使用光谱可以确定晶体中的蛋白质浓度以及晶体的潜在污染。

一个例子的紫外-可见吸收光谱的单个微观蛋白质晶体如下所示。所有的测量都是使用aUV-visible-NIR范围显微分光光度计来自CrAic Technologies™。使用UV透明悬挂槽孔板来生长晶体，并且在仍然在板中进行晶体的光谱。为了在280nm处显示蛋白质和盐晶之间的透明差异，还捕获了蛋白质晶体的图像。

单蛋白晶体的吸收光谱

图1。单蛋白晶体的吸收光谱，从中可以测定晶体中蛋白质的浓度。单峰表明是纯蛋白晶体。

蛋白质晶体的UV显微镜图像。

图2。蛋白质晶体的UV显微镜图像。盐晶清晰。

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引用

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美国心理学协会
CRAIC技术。(2020年10月23日)。使用紫外显微镜识别和定位生长中的蛋白质晶体。AZoM。于2021年9月07日从//www.washintong.com/article.aspx?ArticleID=13835检索。
MLA.
CRAIC技术。“使用紫外线显微镜识别和定位生长中的蛋白质晶体”。氮杂。2021年9月07。< //www.washintong.com/article.aspx?ArticleID=13835 >。
芝加哥
CRAIC技术。“使用紫外线显微镜识别和定位生长中的蛋白质晶体”。AZoM。//www.washintong.com/article.aspx?ArticleID=13835。(2021年9月7日生效)。
哈佛大学
CRAIC技术。2020。使用紫外显微镜识别和定位生长中的蛋白质晶体。Azom，浏览了2021年9月07日，//www.washintong.com/article.aspx?articleid=13835。