使用拉曼谱检测程序批量晶化

开发技术以实时监控制药法近些年来受到极大关注。

举例说,FDA设计质量分析技术倡议完全侧重于这些活动,以促进对使用方法的全面理解,并确保高效生产高质量产品而不依赖无效生产后质量控制

药质蛋白结晶化法必须深入审查,因为它是一个敏感过程,很容易受条件敏感度影响,例如pH值、温度和系统物种集中度

文章将视方式光谱镜像应用研究实验室级分解lyszymeLysozyme是一种常见蛋白质,选择它是因为其晶化研究良好,使它适合概念验证实验确认过程监测法

Raman光谱分析用于检验温度效果、晶化时间和沉积代理物集中度此外,还研究这些因素交互作用。

实验程序

分析使用D-最优实验设计,依赖温度、沉淀剂集中度(NaCl)和时间Kaiser光系统ramanRxn系统TMraman分析器安装InvitusTM785m激光器用于过程监控

每种样本所应用温度介于15-45摄氏9小时范围,光谱采集方式是在10分钟热平衡期后对样本进行10秒接触20次spetra固晶体使用10x非接触光学采集,水溶解光谱使用1⁄4沉浸式探针采集

结果

Lysozyme760、750、2940和155cm功能拉曼波段^-1.除强度带外760-750cm之比^-1带提供实用过程数据取指纹区全景介于500至1800cm^-1图1显示

图1raman指纹区acetate缓冲水解初始富集度:90 mg/ml(固线)、30mg/ml(虚线)和0mg/ml(斜线)。可用峰值量化分析为 2940、760、750和155cm^-1.

液态富集解析法与纳氏沉淀剂集中法关系可见图2150cm2940m^-1液态波段与 NaCl集中性直接不同750-760cm重叠形状^-1区域高度复杂,一增一减

面向此特殊研究 2940cm^-1带证明对量化进程监控极有帮助760/750cm^-1比率也提供极佳有效度

图2lysuzyra逐步加法 Nacl底片对称纳氏最高集中度

轮廓图(图3)强度为2940cm^-1带相匹配 NaCl集中度和温度使用D优化实验所得多变数据

图32940-cm表面强度图^-1suzyme拉曼带温度和 NaCl浓度

组合表块和对晶体的视觉分析揭示出液晶化的合适条件(35-40摄氏度和5-9%(w/w) NaCl)

结论

这些结果显示能力光谱镜像提供综合量化过程知识功能允许快速多变监控蛋白结晶过程,使Raman光谱分析成为实时控制扩展过程的潜在工具

亚博网站下载这些资料取自Kaiser光学系统公司提供的材料并经过审查修改

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