相关拉曼成像和扫描电子(RISE)显微镜(图1)是共聚焦拉曼和扫描电子显微镜(SEM)成像的独特组合,为样品表征提供了新的可能性。有了这种先进的相关显微镜,就有可能将超结构表面性质与分子化合物数据联系起来。
图1所示。增加显微镜
共焦拉曼成像
样品中的分子化合物可以用共焦拉曼成像它是一种结合了共聚焦显微镜和拉曼光谱的技术。这种非破坏性光谱技术是基于光与样品中的化学键相互作用而产生的拉曼效应。由化学键振动引起的相互作用引起的背向散射光的能量转移可以被观察到作为一个独特的拉曼光谱。
共焦拉曼成像技术检测和捕获样品中化学成分的空间分布。它也可以分析样品的其他特征,包括结晶度、应力和应变状态。利用高分辨率共聚焦拉曼显微镜可以在每个图像像素处收集整个拉曼光谱的信息,在衍射极限~200nm处产生横向分辨率。共聚焦显微镜配置还具有出色的深度分辨率和生成3D拉曼图像和深度剖面的能力。
扫描电子显微镜
样品的形貌和形貌可以用扫描电镜技术测定。这种高分辨率成像技术与其他成像技术兼容。它包括使用聚焦的高能电子束对样品进行扫描以生成图像。电子-样品相互作用产生背散射电子和二次电子,检测这些电子产生表征形貌、材料取向、表面结构和样品形貌的图像。亚博网站下载
扫描电镜技术获得的图像在微或纳米分辨率和放大范围10 - 10.000倍。非破坏性方法也可以产生三维外观的表面,因为它有大的景深。
增加显微镜
通过具有共焦拉曼和扫描电镜成像RISE显微镜能够将超结构表面信息与分子化合物数据连接起来。在两种技术之间切换时,样品转移和重新定位是自动的。这是可能的关联的结果,并覆盖的图像。
样品的化学特征可以通过使用扫描电镜和能量色散x射线光谱(EDX)来获得。然而,共焦拉曼成像比EDX更有优势,因为它可以检测化学元素以及样品的化合物和分子。也可以对样品中各成分的空间分布进行成像。
应用实例
在一项研究中,使用TESCAN的RISE显微镜对地质闪长岩样品进行了分析,没有对样品进行染色或固定。首先使用RISE显微镜的SEM显微镜功能分析样品的表面结构(图2A)。
在进行表面结构分析后,将样品转移并放置在电子显微镜的真空室中进行共聚焦拉曼成像,以记录样品处于拉曼成像模式。在每个图像像素处产生了代表分子组成的完整拉曼光谱。
然后叠加获得的SEM和彩色拉曼图像,将超微结构与分子组分进行比较(图2B)。由此产生的拉曼光谱如图2C所示,能够根据其特征拉曼“指纹”来识别每个化合物。
图2。A)地质闪长岩样品的SEM图像B)与拉曼图像叠加的SEM图像。C)相应的彩色编码拉曼光谱显示样品的每个分子成分。
在另一个例子中,将仓鼠脑组织放置在切片片上,使用显微镜。在扫描电镜图像中可以观察到的结构差异,清楚地区分了白质和灰质。在扫描电镜上叠加彩色拉曼图像,可以更精确地观察灰质和白质的分布(图3A)。从其特征拉曼光谱可以清楚地区分组织(图3B)。
图3。A)仓鼠脑组织样本的Raman-SEM图像叠加图。B)对应的拉曼光谱揭示了白质和灰质不同的光谱特征。
结论
结果清楚地证明了增加显微镜将超结构表面数据与分子化合物数据连接起来,为深入的样品表征开辟了新的维度。RISE显微技术的用户友好性和卓越的分析优势使其成为众多应用领域的宝贵工具,包括生命科学、地球科学、聚合物科学、材料科学、制药和纳米技术。亚博网站下载亚博老虎机网登录
TESCAN USA Inc .)
TESCAN成立于1991年,由特斯拉的一群管理人员和工程师组成,其电子显微镜的历史始于1950年,如今TESCAN是聚焦离子束工作站、扫描电子显微镜和光学显微镜的全球知名供应商。TESCAN的创新解决方案和与客户的协作性质使其在纳米和微技术领域处于领先地位。该公司很自豪地参与了一系列科学领域的卓越机构的首要研究项目。TESCAN在价值、质量和可靠性方面为客户提供一流的产品。TESCAN USA inc .)的北美手臂TESCAN奥赛控股一家跨国公司合并建立的TESCAN捷克公司,全球领先供应商的sem和聚焦离子束工作站、物理奥赛和法国公司,世界领先的定制的聚焦离子束和电子束技术。
这些信息已经从TESCAN提供的材料中获得、审查和改编。亚博网站下载
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