酿酒工业酵母细胞计数和分级

库尔特原理技术在啤酒厂用于酵母细胞计数和分级。Multisizer™3和Z™系列仪器型号是基于这种技术。本文重点介绍了Z系列型号，包括Z2分析仪、Z1双阈值和Z1单阈值。

Z系列模型在酵母细胞计数和分级中的作用

酵母细胞的分析是在发酵过程中进行的，酵母菌株将麦芽汁中的碳水化合物转化为酒精和副产品，如二氧化碳。发酵过程涉及几个阶段，在这几个阶段中，酵母细胞的分析是进行的。

投球过程是细胞计数的关键步骤，通过将活酵母培养物引入冷却的麦芽汁中开始发酵过程。投球是通过传递适当的细胞浓度来确保成功发酵的关键。

啤酒的味道也会受到酵母浓度的影响。沥青浓度通常为30.3 × 10⁶细胞/毫升。初始酵母细胞浓度可以通过Z1单阈值或双阈值来确定。需要一个Z2模型来测量尺寸分布。

取样通常在发酵过程中进行，此时酵母细胞可能处于萌芽阶段。出芽细胞将被Z系列仪器作为单个单位来枚举。在发酵过程结束时收集的样品可能在随后的分析中显示蛋白质物质的存在。建议使用Z2分析仪对这些样品进行分析。

大小分布直方图可以揭示人口双模大小,显示了酵母细胞数量和絮凝的蛋白质(图1)。一些2 m氢氧化钠(氢氧化钠)添加到酵母样蛋白质的去除材料,以及由此产生的样本在Z2模型进行了分析。

图1所示。带有双峰的酵母样品。第一个峰是酵母峰，第二个峰是絮凝蛋白峰。次级峰可大于酵母细胞峰。图片来源:Beckman Coulter

仪器仪表和实验步骤

可根据要求选择的仪器包括Zl单阈值P/N 6605698, Zl双阈值P/N 6605699, Z2分析仪P/N 6605700或Accuvette™Cups BCI P/N 8320592。实验用的试剂有2M NaOH Sigma、Z pak、L3 Beads、L5 Beads、L10 Beads、P/N S8263、BCI P/N 8320312、BCI P/N 6602793、BCI P/N 6602794、BCI P/N 6602796。

对于Z1双阈值和Z2分析仪，大约10µL的酵母样品添加到20 mL Isoton II。实验设置为100µm的孔径管，设置3µm为下阈值，10µm为上阈值。计数模式设置在TL和TU之间，稀释因子为2000。

对于Z1 Single Threshold，在20ml Isoton II中加入10µL的酵母样品制备样品。采用100µm孔径管，下限为3µm。计数模式设置在TL以上，稀释倍数为2000。

下一步是Z系统的校准，包括向20毫升Isoton II中加入5滴L10 Beads，然后通过倒置的方式进行轻柔搅拌，以避免引入气泡。然后，按下键盘上的“Cal”按钮，进入C1页面。将单位设置为微米后，在校准尺寸中进入数字模式，按下“开始”按钮来记录校准因子。同样的程序重复三次，得到平均结果，然后输入新的校准因子。

对于运行尺寸标准，选择Set Up，将下阈值设为3µm，上阈值设为10µm。在TL和TU之间设置计数模式，现在在Isoton II中加入5滴L5 Beads，通过倒置的方式温和混合。然后按下“开始”按钮开始运行。结果数据在运行后由Accucomp软件获取(图2)。如果有样本控制，此时需要运行它们。

图2。L3和L5珠用于设置尺寸参数。图片来源:Beckman Coulter

运行样品，选择输出，稀释系数设置为2000。稀释因子值随样品密度的不同而不同。结果类型设置为浓度，在20 mL Isoton II中加入约10µL的样品，轻轻混合。现在，按下“开始”按钮开始运行。运行后的结果由Accucomp™软件获得(图3)。

图3。酿酒酵母，在37ºC蒸馏水中培养2小时。平均酵母细胞大小为3.5µm。团聚体呈7µm或更高。图片来源:Beckman Coulter

对于如图1所示的双峰样品，在样品中加入4滴2M NaOH，轻轻混合。下一步是将得到的溶液孵育5分钟。然后，按下“开始”按钮开始运行。下入后使用Accucomp™软件获取数据。

结论

结果清楚地说明了在酿造工业中使用Z系列模型进行酵母细胞计数和分级的优势。

这些信息已经从贝克曼库尔特公司提供的材料中获得，审查和改编。亚博网站下载

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