多检测器大小排除色谱

起司过程的副产品称为whey,而当从牛奶中分离成份时组成食物补充物和食品成份被称为whey蛋白分离物

WPI有大量纯蛋白,即脂肪、胆固醇、乳糖和碳水合物免费高营养值WPI用于食品行业的许多产品中:

• 卫生食品
• 婴儿公式
• 稳定器
• 仿真程序

WPI四大组件为:

• e-lactogloblin-主要见诸牛羊和除人乳以外的许多其他哺乳动物小型蛋白质含162氨基酸和分子重量18.4kDa大都像稀疏
• Al-Lactbumin-a蛋白质从大多数哺乳动物的牛奶中发现,并需要乳糖生产分子重量14178k
• 血浆相簿-肝脏生成并代之为脂肪酸、类固醇和甲状腺荷尔蒙的载体蛋白分片压力平衡外细胞流体积球状水溶蛋白分子量为65kda
• Immunoblulins-分子量为150kDa,对消除外国对象有用

下文章使用ViscotekTDAmax Malvern剖析法分析WPI样本WPI四大构件分离研究

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上头ViscotekTDAmax系统由紫外线(UV)、反折索引(RI)、固有粘度(IV)、90度光散射(RALS)和7度光散射检测器组成样本除以两个ViscotekP-Clums(300x7.8毫米ID)、1xP4000和1xP3000,蛋白分子权排除限值分别为700kDa和1000kDa移动相位为0.1MpH 7.0磷酸缓冲带,注入总料约500mg供个体测量使用OmniSEC软件使用并发分析研究染色图

结果和讨论

组件定性

保留体积(RV)分别绘制在X轴和Y轴上,反射索引(RI)、紫外线(UV)、右角光散射(RALS)、低角光散射(LALS)、DP(VERCUT)

图1组件特征描述

表1

	Immnolublin	血清相册	e-lactogloblin	ffa-lactbumin
峰值RV-	17.057	18.174	19.238	20349
Mn-	150329	70310	30745	15410
Mw-	151 366	70 469	31 847	15549
Mz-	152 485	70 635	33125	15 697
Mp-	127 955	69619	30683	15800
Mw/Mn	1.007	1.002	1.036	1.009
四-(dl/g)	0.0596	0.0506	.0339	0.0289
Rhw-NM	5.181	3 833	2.564	1.921
WtFr(Peak)	0.024	0.064	0.737	0.175

dn/dc所有蛋白质固定为0.185峰3的分子权值和权值分数分别为33kDa和75%显示它为WPI关键组件e-lactogloblin单片量为18.4k3kDa峰值证明表示dimAl-Lactalbumin/峰4检测到分子重量15kDa,从而与理论数据相协调

一种观察显示RI峰值对a-Lactbulin的高度小于二分之二,但UV信号高度完全相同。表示二零零零二年二百分百比二百零二百分百高

基于分子权值计算 70k和150k峰值 分别分配到血清相簿和免疫球素预测四大峰值小于1.04,因为蛋白质值小于1.04因分离机制,流体运动半径值随保留量下降并证实分子量较低蛋白体积小

固有粘度值还随分子权重下降但它不以线性方式发生,从而显示蛋白质结构的差分i-lactobulin二元本底比a-lactbum单元值高15%,尽管是分子权值的2倍说明角形单词结构比单词单词结构紧凑性强

聚合检测

图2

LALS和RALS检测器显示单峰值,低保留量为10-12mL,而RI或UV检测器没有任何峰值

RI和UV信号与集中成比例,因此峰值集中度极低光散与分子权乘集中成比例,因此分子权势必须大到足以显示光散块中的峰值集合体大小清晰显示它偏向低保留量

检测还检测到面压计检测器没有形成峰值原因是这些聚合物非常紧凑和压缩,内部粘度低异于纤维结构或其他结构

结论

从单项实验中获取的数据显示ViscotekTDAmax可以描述非常复杂的蛋白混合体特征,如WPI中发现的那些混合体,如果它们能通过色谱法很好分离的话。有可能研究所有四种WPI组件并基于结构、集中度、分子量和流体运动体积定性某些蛋白聚合物也可以通过光散射检测器识别,即使它们极低浓缩度允许完全定性

因此,TDAmax能力使其适合食品和营养应用,如上表或生物药理研究等其他蛋白相关应用

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