磺酰胺是合成抗菌药物，由于其广泛和高谱活性，通常用于治疗细菌生长。磺酰胺在食物级蜂蜜的加工过程中通常被使用，它们的残留物通常存在于蜂蜜样品中，这可能会给全球的消费者带来重大风险。本文介绍了使用Bruker Evoq Elite三重四倍液相色谱质谱仪（LC-MS/MS）的案例研究，并在确定所需的最大残留限制（MRLS）的确定磺酰胺方面表现出了较高的灵敏度和选择性，并根据所需的最大残留限度（MRLS）来证实该技术欧盟委员会决定规定的标准。
磺酰胺的风险
磺酰胺药物抑制细菌产生叶酸，从而防止细菌生长和繁殖。
尽管磺酰胺对不同的细菌有效，但它们的使用却相当有限，因为它们以引起过敏性人体的极端过敏反应而闻名，并且可以使人类暴露于耐药细菌中。
国际磺酰胺调节
由于磺酰胺暴露会给消费者带来潜在的风险，因此不同的区域设置了自己的最大残留限度（MRL），最低性能水平（MRPL）和确定磺酰胺的特定检测标准。欧盟已经建立了磺胺酰胺的MRPL，蜂蜜的水平为10 µg/kg。它还为解释测试结果的解释设定了共同的标准，以确保批准的实验室为官方残基控制产生的分析结果的质量和可比性。
检测磺酰胺
有许多方法可用于确定和量化食品级蜂蜜产品中的磺酰胺。但是，如果有复杂的食物基质，许多技术具有较差的灵敏度和选择性，因此不能利用确定蜂蜜中磺酰胺的水平。为此，可以使用液相色谱和质谱法的组合来解决此问题。
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图1。在食品级蜂蜜中经常检测到磺酰胺。
一个案例研究表明了如何EVOQ Elite LC-MS/MS可以用来检测量子与预选器离子的恒定离子比，检测磺酰胺水平至0.1ppb。该方法快速而简单，可用于定量蜂蜜中的磺酰胺，并且被发现可重复且线性，相对标准偏差（RSD）<12％，回归（R）= 0.996。EVOQ提供了高特异性和灵敏度，并且足够灵活，可以实现高样品吞吐量，以检测和定量磺酰胺。
EVOQ的高灵敏度反映了离子源中的几种硬件创新，例如抑制雾化气体再循环的活动排气，从而减少了化学噪声。这也可以减少停机时间，并消除了清洁和运行样品的时间，从而在高吞吐量实验室中提供了高生产率和出色的灵敏度。
此外，Bruker的Pacer Software还补充了EVOQ的硬件，该软件提供了基于异常的数据审查，以大大降低定量分析的错误率。这样，PACER通过减少时间扫描来提高效率，从而影响数据质量并加快样本到报告时间的速度，这对于从事常规定量的实验室非常重要。
使用EVOQ质谱仪对磺酰胺进行定量
EVOQ ELITE三二次液相色谱质谱仪用于测量蜂蜜中的九种磺酰胺，如下表所示：
表格1。EVOQ测试了九种常用的磺酰胺。
| 磺胺二甲毒素（SMM） |
| 磺胺嗪（SD） |
| 磺胺毒素（SDM） |
| 磺胺甲烷（SM2） |
| 磺胺二酰亚胺（SDN） |
| 磺胺嗪（SM1） |
| 磺胺硫唑（ST） |
| 磺胺甲氧替代吡便便明素（SMP） |
| 磺胺甲基（SMZ） |
为了进行样品制备，通过使用三蒸馏水和乙腈稀释单独的磺胺酰胺储备溶液来制备所有九种磺胺酰胺的标准混合溶液。然后，通过在空白的蜂蜜基质中尖峰混合标准溶液的适当体积来制备校准溶液。所使用的仪器校准如下：
| 色谱参数（Advance UHPLC） |
| 柱子 |
布鲁克强度C18（50 mm x 2.1 mm x 3µm） |
| 柱温度 |
周围 |
| 流速 |
0.3ml/min |
| 移动阶段A。 |
水与甲酸 |
| 流动阶段b |
乙腈，甲酸0.1％ |
| 注射量 |
10µL |
| 梯度条件 |
0.000 min 2％b
1.00分钟2％b
2.50分钟10％b
3.50分钟10％b
4.00分钟20％b
6.00分钟20％b
7.00分钟95％b
8.50分钟95％b
8.60分钟2％b
10.00分钟2％b |
| 质谱仪参数（EVOQ Elite） |
| 赫西 |
+4500V |
| 探针温度 |
450°C |
| 探针气 |
45个单位 |
| 雾化器气 |
50个单位 |
| 锥体气温 |
350°C |
| 锥体气 |
30个单位 |
| 主动排气 |
上 |
| 碰撞气 |
氩气 |
| 碰撞气压 |
1.5mtorr |
结果与讨论
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图2。在蜂蜜中以LOQ浓度为0.1ppb的所有九种磺酰胺的色谱图，峰峰值S/N比。
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图3。LOQ水平和空白蜂蜜基质的所有九种磺酰胺的覆盖色谱图。
图2说明了在蜂蜜中以0.1 ppb检查的所有九种磺胺酰胺的色谱图，并具有峰值峰值信号到噪声（S/N）比。发现在0.1 ppb的蜂蜜基质中的所有九种磺酰胺的S/N平衡远高于10。图3清楚地表明，空白蜂蜜基质没有任何靶向的磺酰胺。
案例研究是根据2002/657/EC进行的，该决定指定了许多参数以确认对目标化合物的检测。
如表2所示，该技术可重复使用低于12％的RSD。所有九个磺胺酰胺以0.1 ng/g的限制获得的结果均在精度令人满意的范围内。同样，所有正在研究的九种磺酰胺获得的0.1 ng/g的定量限量大大低于不同区域法规规定的MRL。
表2。蜂蜜性能摘要中的磺酰胺。
| 姓名 |
校准范围（PPB） |
r2 |
％RSD的0.1 ppb 10重复/天 |
1 ppb 10重复/天的RSD％ |
10 ppb的％RSD 10重复/天 |
| 磺胺二甲毒素（SMM） |
0.1-10 |
0.999 |
11.53 |
7.30 |
8.94 |
| 磺胺嗪（SD） |
0.1-10 |
0.998 |
6.61 |
5.04 |
6.45 |
| 磺胺毒素（SDM） |
0.1-10 |
0.996 |
6.82 |
11.43 |
6.65 |
| 磺胺甲烷（SM2） |
0.1-10 |
0.999 |
9.39 |
7.90 |
6.85 |
| 磺胺二酰亚胺（SDN） |
0.1-10 |
0.999 |
3.93 |
7.18 |
6.77 |
| 磺胺嗪（SM1） |
0.1-10 |
0.999 |
5.74 |
11.74 |
6.35 |
| 磺胺硫唑（ST） |
0.1-10 |
0.999 |
6.84 |
6.68 |
5.62 |
| 磺胺甲氧替代吡便便明素（SMP） |
0.1-10 |
0.999 |
5.74 |
7.00 |
4.99 |
| 磺胺甲基（SMZ） |
0.1-10 |
0.999 |
7.84 |
6.88 |
7.81 |
结论
Bruker的EVOQ ELITE液相色谱质谱仪为蜂蜜基质中研究的所有九种磺酰胺提供了出色的可重复性和检测极限。与PACER软件相结合，可以在最快的时间内提供一致的结果。Advance UHPLC的使用还大大减少了总色谱运行时间。因此，更快的样本到报告时间，增强的灵敏度和低维护的组合使EVOQ适合在高吞吐量实验室中处理复杂样品。
该信息已从布鲁克化学和应用市场提供的材料中采购，审查和调整。亚博网站下载
有关此消息来源的更多信息，请访问布鲁克·道尔顿学。