使用动态光散射技术进行大小的亚微米颗粒yabo214

NICOMP 380动态光散射(DLS)粒径分析仪与多角度角度计相结合,可用于尺寸尺寸,在20、60和90度时通过热和冷技术制备。与标准的NICOMP 380相比以及其他大分子由于较大颗粒在正向方向上相对轻的能力而引起的。yabo214

DLS技术

DLS是尺寸亚微米颗粒的标准粒度技术。yabo214通过分散颗粒沿特定方向散射的光强度具有随时间定期更改的趋势。yabo214这些强度与时间轮廓的变化是由于布朗运动引起的颗粒位置的不断变化所致。yabo214

DLS设备从强度与时间轮廓获得相关函数。针对特征衰减时间,研究了这种指数衰减的相关函数,该衰减时间与Stokes-Einstein方程与粒子半径相关,然后与扩散系数相关。与激光衍射相比,DLS技术具有多个优点。DLS提供了绝对测量,因为它不需要了解悬浮颗粒的组成和光学特性。yabo214

获得专利的NICOMP分析算法使测量具有相对较高的分辨率和准确性的偏斜的单峰或近距离模式。DLS技术能够准确地尺寸大于50nm,并迅速易于确定小蛋白质分子的大小。yabo214另外,多角度DLS可用于获取有关蛋白质聚集的定量信息。

NICOMP DLS系统的简短介绍

用多角度NICOMP分析380

在这里,使用配备有APD和高功率的15MW激光二极管的多角度NICOMP 380分析了由热和冷方法制备的BSA。图1显示了在90°获得的每种蛋白质的强度加权PSD。每个PSD包含两个峰:一个在50nm处,另一个在8nm左右。

DLS蛋白在90°处的尺寸分布。A。冷准备;b。热准备。

图1。DLS蛋白在90°处的尺寸分布。A。冷准备;b。热准备。

第一个峰代表天然蛋白。平均直径与同一蛋白质上的早期测量值保持一致。次级峰可以代表样品中存在的聚集体,并且由于视图体积仅包含少数这些粒子而晦涩。yabo214

检测角度的角度NICOMP 380相对于入射光降低至20°,以增加从聚集体颗粒获得的信号强度。yabo214通过这种方式,可以获得对聚集体的更准确的核算。图2显示了每次制剂在20°下获得的强度加权PSD。再次在这里,所得的PSD包含两个峰值,在8nm处的天然峰值,但具有强烈且定义明确的骨料峰。

DLS在20°处蛋白质的大小分布。A。冷准备;b。热准备。

图2。DLS在20°处蛋白质的大小分布。A。冷准备;b。热准备。

该数据显示了NICOMP 380(在90°和20°)表现出的出色分辨率,以及仪器在每种情况下将天然峰与聚集体分离的能力。此外,在每个角度,天然峰的不变平均直径说明了仪器的多角度能力。

图3显示了过滤后温暖准备样品的20°DLS数据,分别通过两个不同的过滤器,一个过滤器,一种过滤100,000兆瓦的单位颗粒,另一个过滤100万兆瓦单位颗粒。yabo214在这里,骨料峰占据了每个过滤样品的PSD。样品的几个新等分试样证实了这些结果。

DLS在20°的温度准备下。过滤后。A。100k mwu;b。1 meg mwu。

图3。DLS在20°的温度准备下。过滤后。A。100k mwu;b。1 meg mwu。

图4说明了通过通过100 K滤波器穿过等分的Puire水的等分试样,在20°下进行的测量结果。在20°处鉴定出较大的散射强度,并在330nm处产生峰值,这与从100 K过滤的蛋白质样品中获得的平均直径相似。

为了了解过滤器对结果的影响,在没有过滤的情况下测试了一个等分的水。这些结果在图4中也被描述,显示在35nm处的峰值,在20°处观察到最大的散射强度。其背后的原因是纳米系统和其他过滤设备具有使水充气的趋势。app亚博体育

DLS在20°的水中用于稀释蛋白质。A。未经过滤;b。过滤后的100K MWU。

图4。DLS在20°的水中用于稀释蛋白质。A。未经过滤;b。过滤后的100K MWU。

图4A显示了大小为35nm的微泡的存在。如图4B所示的结果表示,当水过滤时,气泡聚集了。超声处理是一种脱水的方法。通过100 K滤波器后,将光超声处理应用于温暖的预习惯样品。结果如图5所示。尽管仍然可以看到聚集峰,但由于微泡量的减少,现在可以观察到天然蛋白峰。这些结果与气泡理论一致。

过滤100k MWU和超声处理后,DLS在20°的热预备蛋白下。

图5。过滤100k MWU和超声处理后,DLS在20°的热预备蛋白下。

结论

结果清楚地证明了NICOMP 380的多角度能力以及如何应用于蛋白质和其他大分子应用中。它们还显示了具有成本效益的15MW/APD添加的潜力。

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