使用EVOQ Elite LC-MS / MS系统定量多重反应橙汁和葡萄酒中的葡萄酒

多菌灵是一种广谱杀菌剂，广泛应用于农作物的生产和贮藏。然而，它被认为是一种内分泌干扰物，在接触或消费后可能影响人类健康。此外，这种杀虫剂的环境毒性已被充分证明，这导致在过去几十年里对多菌灵的监管越来越严格，最终在美国被完全禁止使用。

进口水果产品中残留的多菌灵可能对公众健康造成潜在的危害。2011年进口到美国的巴西橙汁被发现含有多菌灵。第二年，进口的中国品牌葡萄酒被发现含有大量多菌灵。因此，FDA已将进口多菌灵的含量限制在不超过10ppb。

液相色谱-三重四极杆质谱联用(LC-MS/MS)是农药筛选的行业标准分析方法。本文讨论了利用Bruker EVOQ LC-MS/MS系统建立定量MRM分析橙汁和葡萄酒基质中多菌灵的方法，其校准范围从0.005ppb到50ppb。

EVOQ Elite LC-MS/MS系统

的EVOQ三相四极杆液相色谱(LC-TQ)（图1）用于以奇异的目的在最快的样本到报告时间内执行许多真实样本的可靠量化。它提供了前所未有的灵敏度，线性度，精度，精度和多种反应监测（MRM）测定的广泛动态范围。大气压电离（API）技术和软件的进步使其成为常规高灵敏度，定量分析的革命性技术。

图1所示。EVOQ Elite LC-MS/MS系统。

通过最低的系统延迟体积，APPARD LC泵技术在分析流速下提供了前所未有的弹道梯度再现性。这种设计设计功能可降低梯度延迟并确定高度精确的保留时间，从而具有较短的运行循环时间，具有对定量LC-MS / MS / MS分析的再现性。

通过促进方法驱动，在线清理或样品预浓度，通过OLE模块延伸LC-TQ性能。在同一模块中包含第三泵可节省台式空间并在完全软件控制下简化配置，同时提供快速方法开发的灵活性。以下是EVOQ ELITE LC-MS / MS系统的关键优势：

• 由于新颖的交错的四极（IQ）双离子漏斗，可以容易地获得对生物分子和微小分子的超高敏感性。
• 可靠地运行基质丰富的样品在强大的孔板为基础的API接口。
• 利用新型真空绝缘探针(VIP)加热电喷雾探针，可以在高流速下有效地分析热不稳定分子。
• 基于异常的数据审查软件通过方便地突出显示不满足预设方法标准的色谱图来节省时间。

样品制备和实验设置

用于分析果汁中农药的样品制备通常适用于两种策略：固相萃取（SPE）或“稀释”，其中“稀释和射击”是由于其操作简洁的合适技术。通常在分析之前进行溶液以减少由高浓度的内源材料引起的基质效应。然而，已经进行了很少的分析以确定适当的稀释因子或评估稀释因子导致的碳碱分析的基质干扰。

这里,样品分析包括橙汁样品A和B,红酒和葡萄酒样品,白葡萄酒,和红酒的样本稀释用水“dilute-and-shoot”分析,使用5 x, x 20, 100倍,200倍,500倍,1000倍稀释因素,其次是飙升,1磅多菌灵。此外，制作了0.005、0.01、0.05、0.1、5、10和50ppb水平的多菌灵校准标准。

色谱（前进UHPLC）

• 色谱柱:YMC C18-Hydro, 50mm x 2mm x 3µm
• 注入体积5µL
• 流量:400µL / min
• 溶剂A:水+ 0.1%甲酸+ 10mM甲酸铵
• 溶剂B：MeOH，+ 0.1％甲酸+ 10mM甲酸
• 梯度条件：

  0.0分钟	30％B.
  0.2min.	30％B.
  2.0分钟	60％B.
  2.1min.	95％B.
  3.1min.	95％B.
  3.2分钟	30％B.
  5.2分钟	30％B.

质谱（EVOQ Elite）

• vip加热ESI -阳性模式
• 喷雾电压：4000V
• 雾化器气体流量:50个单位
• 加热探针气流：45个单位
• 加热探头温度:450°C
• 锥气流：15个单位
• 锥温度:300°C

实验结果

图2描绘了稀释后的橙汁和葡萄酒样品的基质效应与稀释系数的比例，显示了在100倍以上的稀释情况下，橙汁的基质效应降低到20%以下。对于葡萄酒样品，至少需要200倍稀释才能将基质效应降低到20%以下。

图2。基质效应%对稀释系数的影响表明，橙汁的适宜稀释系数为100倍，酒的适宜稀释系数为200倍。

通过EVOQ敏感性和再现性评估的Carbendazim的定量极限为0.005ppb（图3）。10级重复注射0.01ppb碳氮泽的RSD％为3.4％，显示出突出的敏感性和鲁棒性EVOQ Elite LC-MS/MS系统(图4)。

图3。校准曲线从0.005 ppb到50 ppb。

图4。EVOQ敏感性和再现性评估。10个复制喷射的RSD％占3.4％，表明了良好的敏感性和鲁棒性。

通过EVOQ Elite LC-MS / MS系统的稀释空白基质分析的定量结果（表1）从稀释的空白基质中的分析表明所有样品都有痕量的碳氮扎嗪，但远低于FDA接受的10ppb水平。然而，发现200倍稀释的红葡萄酒A的碳氮化浓度为3740ppb，其可接受水平超过300倍（图5）。

图5。稀释200倍的B酒和稀释200倍的A酒的重叠离子色谱图。

表1。EVOQ LC-MS/MS分析稀释空白基质中的多菌灵。

空矩阵	稀释因子	测量浓度。（PPB）	浓缩的计算。（PPB）
橙汁一	One hundred.	0.012	1．2
橙汁B	One hundred.	N/A	<0.5
白葡萄酒A.	200	N/A	<0.5
红酒一个	200	0.007	1．4
红酒B	200	18.7	3740

结论

结果清楚地证明了EVOQ Elite三四极LC-MS/MS开发适用于Carbendazim定量的基于LC-MS / MS的MRM方法。

这些信息来源于布鲁克化学和应用市场公司提供的材料。亚博网站下载

有关此来源的更多信息，请访问力量Daltonics．